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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第2年

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ELISA試劑盒
ATCC細(xì)胞
細(xì)胞
蛋白
生化試劑
標(biāo)準(zhǔn)品
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中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
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肉類(lèi)及相關(guān)產(chǎn)品 實(shí)驗(yàn)室耗材系列 細(xì)胞系列 抗體純化試劑 單抗、多抗研制用材料 細(xì)胞培養(yǎng)用材料和試劑 免疫分析相關(guān)試劑 免疫分析科研試劑盒 抗體純化試劑盒 抗血清系列 動(dòng)物血漿系列 熱滅活血清系列 碳吸附過(guò)濾血清系列 培養(yǎng)細(xì)菌專用血清系列 動(dòng)物血清系列(pet瓶) HRP標(biāo)記抗原 天然純化抗原 動(dòng)物Ig類(lèi)抗原 基因重組抗原 膠體金標(biāo)記一抗(多抗為抗原親和純化,單抗為G或A蛋白親和純化 ) HRP標(biāo)記二抗(抗原親和純化) HRP標(biāo)記一抗(多抗為抗原親和純化,單抗為G或A蛋白親和純化) 多克隆抗體二抗/PcAb(未標(biāo)注的為G或A蛋白親和純化) 多克隆抗體一抗/PcAb(未標(biāo)注的為G或A蛋白親和純化) 單克隆抗體二抗/McAb(G或A蛋白親和純化) 單克隆抗體一抗/McAb(G或A蛋白親和純化) 裂解血 抗凝動(dòng)物血系列 脫纖維動(dòng)物血系列 無(wú)菌過(guò)濾動(dòng)物血清系列 輻照滅菌動(dòng)物血清系列 無(wú)菌采制動(dòng)物血清系列
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科研細(xì)胞
細(xì)胞生物學(xué)試劑

血清使用的注意事項(xiàng)

時(shí)間:2011/4/25閱讀:1144
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1、血清必須貯存-20℃,如存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)兩周,對(duì)于某些單位一次無(wú)法用完一瓶,可在無(wú)菌條件下將其40-45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中(或血清瓶中),由于血清解凍時(shí)體積會(huì)增加10%,必須預(yù)留此膨脹體積的空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。
2、一般公司所提供的血清一般為100ml和500ml裝量,因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清:-20℃→4℃冰箱或冷庫(kù)溶解24小時(shí)→室溫下全溶后再分裝,一般以50 ml無(wú)菌離心管中分裝40-45ml。使用過(guò)程中要特別注意,必須規(guī)則地將血清搖晃均勻,小心勿造成氣泡,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由-20℃放置至37℃環(huán)境下解凍,因?yàn)闇囟雀淖兲?,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而產(chǎn)生沉淀。
3、血清的滅活(heat-inactivation)一般是指56℃,30分鐘水浴加熱已*解凍的血清,加熱過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。此處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)去活化。但是,經(jīng)過(guò)滅活處理的血清會(huì)因而造成沉淀的顯著增多,且會(huì)影響血清的品質(zhì)。所以,有的公司所生的細(xì)胞培養(yǎng)用牛血清不做滅活處理,由客戶自行選擇。而診斷試劑用血清在除菌過(guò)濾前進(jìn)行過(guò)滅活處理。
4、在使用血清的時(shí)候,勿將血清留置于37℃太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分會(huì)因而受到破壞,影響血清的品質(zhì)。
5、一般我們?cè)谑褂眠^(guò)程中是先過(guò)濾培養(yǎng)基,再加血清,勿直接過(guò)濾血清。
6、血清的沉淀物:
(1)凝絮物:其產(chǎn)生的原因有多種,但普遍的原因是血清中的脂蛋白(lipoprotein)變形及解凍后血清中存在的纖維蛋白(fibrin)造成,這些凝絮沉淀物不會(huì)影響血清本身的品質(zhì)。除非必須,如果您想減少這些沉淀物,建議可用離心3000rpm,5min去除,或離心后取上清液加入培養(yǎng)基中一起除菌過(guò)濾。
(2)顯微鏡下觀察“小黑點(diǎn)”,通常經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為是血清遭受污染(如黑膠蟲(chóng)),而將血清放置在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沉淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物的增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基檢測(cè),又沒(méi)有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。
 

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