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組蛋白乙?;c大腦功能和抗血清的制備

時間:2016/3/11閱讀:328
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    研究人員發(fā)現(xiàn),組蛋白和非組蛋白的賴氨酸乙酰化是基因表達的關鍵調(diào)節(jié)子,控制著大量的細胞生物學過程,包括神經(jīng)元的生長及其可塑性。越來越多的研究表明,賴氨酸的乙酰化和去乙?;瘜τ诖竽X功能和相關疾病非常重要。研究人員zui近發(fā)表綜述,探討了組蛋白乙?;腿ヒ阴;诖竽X功能(尤其是認知功能)中起到的作用。

    將突觸活性與基因表達關聯(lián)起來的轉錄程序,對于大腦可塑性非常關鍵,而可塑性是大腦功能的基礎。組蛋白乙?;苷{(diào)節(jié)這些轉錄程序,實際上在許多情況下,轉錄因子和組蛋白修飾酶會一起被招募到與可塑性有關的基因上。賴氨酸乙?;怯少嚢彼嵋阴^D移酶(KAT)催化的,一般是促進大腦的認知能力。相反的過程由組蛋白賴氨酸去乙?;肛撠煟℉DAC),在多個大腦區(qū)域對認知能力進行負調(diào)節(jié)。

    KAT或HDAC發(fā)生突變或調(diào)控異常,會引起神經(jīng)機能障礙和神經(jīng)退行性變。而HDAC抑制子可以作為治療藥物,對抗衰老和神經(jīng)退行性疾病引起的認知衰退,改善抑郁癥和創(chuàng)傷后應激障礙等疾病的癥狀。

    抗血清指含有抗體的血清。傳統(tǒng)的抗血清制備方法是將某種抗原通過多次注入動物,數(shù)十天后或數(shù)月后,采集動物血,立即分離出血清。此抗血清在保存或應用前必須作效價和特異性鑒定及純化。 

(一)免疫動物的選擇 

免疫動物的選擇基本要求: 

1.抗原與免疫動物的種屬差異越遠越好。 

2.動物必須適齡、健壯、無感染、體重合乎要求。 

3.不同動物對同一免疫原有不同的免疫應答表現(xiàn)。因此針對不同性質(zhì)的免疫原,選用相應的動物。蛋白質(zhì)抗原大部分動物皆適合;甾類激素多用家免;酶類多用豚鼠。 

4.抗血清要求:為R(rabbit)型或H(horse)型血清。R型抗血清是以家兔為代表的小型動物產(chǎn)生的抗血清,能和很小量抗原結合形成沉淀線,而H型抗血清則以馬為代表的大型動物產(chǎn)生的抗血清,較少用于沉淀反應。 

此外需要制備大量免疫血清時,應選用馬、綿羊等大動物;若需要量不多,則選用家兔、豚鼠和雞等小動物。

(二)免疫方法及途徑 

1.免疫原的注射劑量:應考慮抗原性強弱、分子量大小、動物的個體狀態(tài)和免疫時間??贵w需要量多,時間間隔長,劑量可適當加大。 血清

2.免疫途徑:通常有靜脈、腹腔、肌肉、皮內(nèi)、皮下、淋巴結及足掌等。若抗原寶貴可采用淋巴結內(nèi)微量注射法;半抗原宜皮內(nèi)多點注射。 

3.免疫方案:根據(jù)設計的目的要求、抗原性質(zhì)、佐劑的種類來制定免疫方案??刹捎萌棵庖叻?、微量免疫法或混合免疫法。 

4.抗體產(chǎn)生階段:可分靜止期(約2天,血中尚無抗體);指數(shù)期(約4天左右,抗體迅速上升);穩(wěn)定期(約2~4周,抗體保持一個穩(wěn)定水平);下降期(約幾個月后,此時抗體緩慢下降)四個階段。 

(三)動物采血法 

動物采血法有頸動脈放血法、心臟采血法、靜脈多次采血法等。血清

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