一、非特異性染色的識(shí)別
常出現(xiàn)在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處,壞死組織及固定不良的組織中心處。表現(xiàn)為彌漫性,均勻性的背景染色。也可以是隨機(jī)分布的陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物點(diǎn)、團(tuán)或塊狀。抗體
二、非特異性染色的原因
1. Ig與Fc受體結(jié)合
多見(jiàn)于冰凍切片(特別是淋巴造血組織,淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞,組織細(xì)胞表面多),主要是和二抗反應(yīng),因?yàn)橐豢挂话阆♂尪染^大,因此Fc受體的干擾基本不存在。由于福爾馬林固定破壞了大部分的Fc受體,所以石蠟切片不多見(jiàn)。
避免方法:
(1)用以二抗相同種族的正常血清封閉切片;
(2)用不含F(xiàn)c段的抗體,但價(jià)格貴。(V區(qū),C1區(qū)不含F(xiàn)c段,用Pepsin消化)
2. 靜電吸附
抗體是一種帶負(fù)電荷的球蛋白,容易和帶正電荷的組織相結(jié)合,如膠原纖維。
避免方法:
(1)盡量稀釋一抗;
(2)降低抗體的電荷,如用2.5%NaCl,0.05mTBS代替PBS;
(3)用去垢劑如triton-100,Tween-20等處理切片。