乙肝核心抗原(HBcAg)ELISA試劑盒操作說(shuō)明
在長(zhǎng)期的銷(xiāo)售實(shí)踐中,ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)形成了*的市場(chǎng)優(yōu)勢(shì):產(chǎn)品齊全、價(jià)格合理、經(jīng)營(yíng)穩(wěn)健、信息反饋及時(shí)、并能隨時(shí)隨地享受?chē)?guó)外供應(yīng)商zui直接、zui周到、zui完善的售后服務(wù)。
ELISA試劑盒操作步驟:
1.平衡:將試劑盒各組分從盒中取出,平衡至室溫(18℃-25℃),微孔板開(kāi)封后,余者即時(shí)以自封袋封存。
2.配液:濃縮洗滌液配制前充分搖勻(如有晶體應(yīng)充分溶解),濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按1:19稀釋后使用。
3.編號(hào):將微孔條固定于支架,按序編號(hào)。
4.稀釋?zhuān)簩⒋郎y(cè)血清樣品1:1000稀釋。
5.加樣:按順序分別在相應(yīng)孔加入100μl已稀釋的待測(cè)血清樣品或陰、陽(yáng)性對(duì)照血清。
6.溫育.置37℃溫育20分鐘。
7.洗滌:用洗滌液充分洗滌5次,洗滌完后扣干(每次均應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間)。
8.加抗原、酶:每孔中加入抗原(HBcAg)、酶標(biāo)記抗體各50μl;輕拍混勻。
9.溫育:置37℃溫育40分鐘。
10.洗滌:用洗滌液充分洗滌5次,洗滌完后扣干(每次均應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間)。
11.顯色:每孔加底物A、B各50μl,輕拍混勻,室溫暗置15分鐘。
12.終止:每孔加終止液50μl,混勻。
13.測(cè)定:用酶標(biāo)儀單波長(zhǎng)450nm或雙波長(zhǎng)450nm/630nm測(cè)定各孔OD值(用單波長(zhǎng)測(cè)定時(shí)需設(shè)空白對(duì)照一孔,30分鐘內(nèi)完成測(cè)定,并記錄結(jié)果)。
ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1.血清的稀釋請(qǐng)使用10mmol/LPBS或生理鹽水。不宜用蒸餾水稀釋。
2.每板建議設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照血清各兩孔,設(shè)空白對(duì)照時(shí),不加樣品、抗原及酶標(biāo)記抗體,其余各步相同。
3.洗滌時(shí)各孔均須加滿(mǎn),防止孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈。
4.加試劑前應(yīng)將試劑瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次,使液體混勻。如果滴加,滴加前應(yīng)棄去1-2滴。滴加時(shí)瓶身應(yīng)保持垂直,以使滴量準(zhǔn)確。注意勿將試劑滴在孔壁上。
5.所有樣品都應(yīng)按傳染源處理。
6.封口膜使用說(shuō)明。
(1)微孔板拆封后,在取出當(dāng)天所需的微孔條后,其余微孔條可以封口膜封存以避免受潮。在封存時(shí),注意勿把封口膜粘貼到微孔條底部,以免影響其透光性。
(2)微孔板溫育時(shí),以封口膜覆蓋孔口,可避免其它因素對(duì)實(shí)驗(yàn)帶來(lái)的非預(yù)期的影響。
7.不同品名、不同批號(hào)的試劑不可混用,以免產(chǎn)生錯(cuò)誤結(jié)果。
8.使用EDTA、*、*作為抗凝劑不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。