常用的滅菌方法有蒸汽濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過濾除菌法。可根據(jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法的組合滅菌。只要產(chǎn)品允許,一般應(yīng)盡可能選用終端zui終滅菌法(即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌)滅菌。若產(chǎn)品不適合采用終端zui終滅菌法,可選用過濾除菌法或無菌生產(chǎn)工藝達(dá)到無菌保證要求,只要可能,應(yīng)對(duì)非zui終滅菌的產(chǎn)品作補(bǔ)充性滅菌處理(如流通蒸汽滅菌)。
一、蒸汽濕熱滅菌法
本法系指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽或流通蒸汽滅菌、過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。流通蒸汽不能*殺滅細(xì)菌孢子,一般可作為不耐熱無菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。高壓蒸汽滅菌該法滅菌能力強(qiáng),為熱力學(xué)滅菌中zui有效、應(yīng)用zui廣泛的滅菌滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、無菌衣、膠塞以及其他其它遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品,均可用本法滅菌。流通蒸汽不能*殺滅細(xì)菌孢子,一般可作為不耐熱無菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。1. 蒸汽滅菌的有關(guān)參數(shù)
(1)D值
D值即微生物的耐熱參數(shù),系指一定溫度下,殺滅90%微生物所需的時(shí)間,以分表示。D值越大,表明該微生物的耐熱性越強(qiáng)。不同的微生物在不同環(huán)境條件下具有不同的D值。
滅菌方法驗(yàn)證時(shí),微生物的耐熱參數(shù)一般使用D121℃ 。
(2)Z值
Z值即滅菌溫度系數(shù),系指使某一種微生物的D值下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位,滅菌溫度應(yīng)升高的值(℃),通常取10℃。它被用于定量的描述孢子對(duì)滅菌溫度變化的敏感程度,Z值越大孢子對(duì)溫度的敏感性越弱。
(3)FT值
FT值系指給定的Z值下,滅菌程序所賦予待滅菌品在溫度T下的滅菌時(shí)間,以分表示。
LgP=lgN0- FT/DT
式中P為滅菌產(chǎn)品中微生物存活的概率。
N0為產(chǎn)品滅菌前微生物的數(shù)量。
滅菌溫度高時(shí),F(xiàn)T值就小,滅菌溫度較低時(shí),所需FT值就大。
(4)滅菌率L
L值系指在某溫度下滅菌1分鐘所相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間(分), 即F0和FT的比值(L= F0/FT = D121℃ /DT)。不同Z值、不同溫度下的L值是不同的,滅菌率均可查得。
(5) F0值
F0值即標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間,系指滅菌過程賦予待滅菌物品在121℃下的等效滅菌時(shí)間,即T=121℃、Z=10℃時(shí)的FT值。121℃為標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài),F(xiàn)0值即為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間,以分表示。一個(gè)滅菌程序的總的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0,應(yīng)包括加熱及冷卻過程。它可以用滅菌率對(duì)時(shí)間求積分的方法計(jì)算而得。
F0=∫t2t1L•dt
式中dt為測(cè)定的間隔時(shí)間,相鄰兩次的間隔時(shí)間通常取1分鐘。
100℃以下,L值可以忽略。F0是作為滅菌過程中監(jiān)控物品達(dá)到無菌保證的重要手段?,F(xiàn)代滅菌器上設(shè)置有F0值自動(dòng)顯示系統(tǒng)。
上述參數(shù)及其關(guān)系為蒸汽滅菌程序的設(shè)計(jì)、驗(yàn)證及日常滅菌效果的監(jiān)控提供了理論依據(jù)。