臨床微生物是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科。隨著醫(yī)學(xué)事業(yè)的發(fā)展和進(jìn)步,微生物檢驗(yàn)人員不僅要具備扎實(shí)的醫(yī)學(xué)理論知識,同時(shí)也要有豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),結(jié)合臨床,充分利用所學(xué)的微生物學(xué)知識和技術(shù),不斷提高快速、準(zhǔn)確的診斷結(jié)果。應(yīng)用簡便的基本操作,選擇合適的培養(yǎng)方法,結(jié)合*、快速的鑒定技術(shù)和藥物敏感試驗(yàn)方法,盡可能快地提供檢驗(yàn)結(jié)果給臨床,指導(dǎo)臨床醫(yī)師及時(shí)合理使用抗生素藥物。
1 重視顯微鏡檢查
對于留取標(biāo)本進(jìn)行革蘭染色,一方面可以掌握標(biāo)本質(zhì)量以確定進(jìn)行培養(yǎng)或重新留取標(biāo)本;另一方面通過鏡檢對某些細(xì)菌可以作出初步分類。
對于膿性分泌物或穿刺液進(jìn)行革蘭染色鏡檢亦可作出大致分類或初步診斷。對泌尿系男性尿道和女性分泌物涂片革蘭染色鏡檢,查到白細(xì)胞內(nèi)或外有革蘭陰性雙球菌,是診斷淋病的重要依據(jù)。腦脊液墨汁染色檢查新型隱球菌,對于臨床診斷隱球菌性腦膜炎有重要價(jià)值。痰、胸水涂片抗酸染色查抗酸桿菌,對于診斷肺結(jié)核有重要意義。糞便球桿菌比例檢查,對于腸道菌群失調(diào)的診斷有重要幫助。糞便暗視野檢測弧菌的運(yùn)動情況,對于霍亂的診斷有意義。
2 用顯色培養(yǎng)基對微生物快速鑒定
在分離培養(yǎng)基中加入檢測某些細(xì)菌特異性酶的底物(由產(chǎn)色基團(tuán)和微生物代謝物如糖苷類,氨基酸或肽類兩部分組成,通常為無色),在特異性酶作用下游離出產(chǎn)色基團(tuán)并產(chǎn)生熒光或顯示一定顏色,用紫外燈觀察菌落產(chǎn)生的熒光或直接觀察菌落顏色即可對細(xì)菌做出鑒定。
如CHRO真菌培養(yǎng)基:白色念珠菌(綠色),熱帶念珠菌(藍(lán)色),克柔念珠菌(粉紅色)。FGM培養(yǎng)基:大腸埃希菌(藍(lán)色)。SSMAC培養(yǎng)基:耐**(MRSA)的菌落為黃色。
3 免疫學(xué)檢查技術(shù)
全自動酶免疫熒光法:如VIDAS全自動酶免疫熒光系統(tǒng)檢測HAV,HBV,HIV,沙眼衣原體等。
膠體金標(biāo)記酶免疫法:檢測HAV,HBV,HIV,CMV,弓形蟲等。
膠乳凝集法:用于檢測肺炎鏈球菌,腦膜炎奈瑟菌A、B、C組,流感嗜血桿菌,隱球菌等。
明膠顆粒凝集法:用于檢測肺炎支原體。
4 核酸探針
將一段已知順序的單鏈核酸(DNA或RNA)加以標(biāo)記(α32pdNTP,HdNTP,SdNTP)就成為核酸探針,可用來探測標(biāo)本中與它具有互補(bǔ)的核酸堿基順序。
應(yīng)用PCR技術(shù)檢測:結(jié)核分支桿菌,幽門螺桿菌,軍團(tuán)菌,支原體,衣原體,HBV,HCV,HIV,CMV等。
5 基因芯片技術(shù)利用
基因芯片技術(shù)檢測標(biāo)本中病原微生物已獲得較大成功,如檢測HIV基因,結(jié)核分支桿菌基因以及其它細(xì)菌基因分型,菌種鑒定,細(xì)菌耐藥基因的檢測等。
6 全自動微生物分析儀和全自動血培養(yǎng)儀
全自動微生物分析儀解決了微生物鑒定的繁瑣問題,縮短了報(bào)告發(fā)出時(shí)間,全自動血培養(yǎng)儀的應(yīng)用,為無菌體液(腦脊液,胸腹水,膽汁,關(guān)節(jié)液)的細(xì)菌分離提供了捷徑,陽性率大大提高。
總之,微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)應(yīng)密切結(jié)合臨床,在平時(shí)工作中不斷學(xué)習(xí)、分析和總結(jié),努力提高微生物檢驗(yàn)的技術(shù)水平,快速準(zhǔn)確地為臨床提供病原學(xué)及藥敏結(jié)果,指導(dǎo)臨床合理利用抗生素,做好細(xì)菌耐藥性監(jiān)測、追蹤和控制,以及流行病學(xué)特征分析研究工作,更好地為臨床服務(wù)。