產(chǎn)品名稱: 大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
規(guī) 格: 48T/96T
檢測(cè)類型:酶聯(lián)免疫/酶免法(ELISA)
保 存:短期4℃/*-20℃保存
檢測(cè)范圍:
100μg/L -3000μg/L
可檢測(cè)樣本:血液標(biāo)本,組織液標(biāo)本,尿液標(biāo)本,糞便標(biāo)本,腦脊液標(biāo)本,胸腹水標(biāo)本等(具體詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢)
供應(yīng)商:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司(國(guó)內(nèi)供應(yīng)商)
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)水平。用純化的大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入神經(jīng)特異性烯醇化酶,再與HRP標(biāo)記的NSE抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NSE呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100μl/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測(cè)溶液A加990μl檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11. 覆膜:5張
12. 使用說(shuō)明書(shū):1份
自備物品
1. 酶標(biāo)儀(建議參考儀器使用說(shuō)明提前預(yù)熱)
2. 微量加液器及吸頭,EP管
3. 蒸餾水或去離子水,全新濾紙
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