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293次何為人*(VD)ELISA試劑盒?
*(vitamin D )為固醇類衍生物,具抗佝僂病作用,又稱抗佝僂病維生素。*家族成員中zui重要的成員是D2和D3。*均為不同的*原經(jīng)紫外照射后的衍生物。植物不含*,但*原在動、植物體內(nèi)都存在。*是一種*,有五種化合物,對健康關(guān)系較密切的是*2和*3。它們有以下三點特性:它存在于部分天然食物中;受紫外線的照射后,人體內(nèi)的*能轉(zhuǎn)化為*。
人ELISA試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. *標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. *標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人*(VD)ELISA試劑盒稀釋原則
1、標本的稀釋原則:
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細的記錄。zui后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
2、標準品的稀釋原則:
2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為500 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋500 pg/ml,250 pg/ml,125 pg/ml,62.5 pg/ml,31.2 pg/ml,15.6 pg/ml,7.8 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制250 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)500 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
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