如何使用酶底物法程控定量封口機(jī)

51孔和97定量盤操作說(shuō)明

51孔和97孔定量盤滅菌消毒

定量盤與DST酶底物法配合使用，定量檢測(cè)100ml水中微生物，將DST-酶底物法試劑與檢測(cè)水樣混合后加入到51孔或者97孔定量盤中，使用程控定量封口機(jī)封膜，根據(jù)檢測(cè)不同項(xiàng)目的培養(yǎng)溫度和時(shí)間進(jìn)行培養(yǎng)（24H），數(shù)出顯陽(yáng)性的孔格，對(duì)照MPN表讀結(jié)果。

【工作原理】

加入含有總大腸菌群細(xì)菌的水樣，目標(biāo)細(xì)菌在Minimal Medium ONPG-MUG培養(yǎng)基中36℃±1℃培養(yǎng)，總大腸菌群細(xì)菌產(chǎn)生的特異性生物酶β一半乳糖苷酶能分解Minimal Medium ONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG,使培養(yǎng)呈現(xiàn)黃色；同時(shí)水樣中大腸埃希氏菌產(chǎn)生特異性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培養(yǎng)基中的熒光底物MUG，產(chǎn)生特征性熒光。同樣原理，耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)在44.5℃培養(yǎng)時(shí)會(huì)分解Minimal Medium ONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG，使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色。

【使用方法】

①定性測(cè)試：

步、在100ml水樣中加入試劑，溶解，36℃±1℃培養(yǎng)24h；

第二步、結(jié)果判讀

        無(wú)色=陰性

        黃色=總大腸菌群陽(yáng)性

        黃色+熒光=大腸埃希氏菌群陽(yáng)性

注：耐熱大腸群菌（糞大腸菌群）需44.5℃培養(yǎng)24h后，觀察黃色為陽(yáng)性

②定量檢測(cè)

步、在100ml水樣中加入試劑，溶解；

第二步、倒入51孔定量檢測(cè)盤（定量孔板）或97孔定量檢測(cè)盤（定量孔板）中；

第三步、用程控定量封口機(jī)對(duì)定量檢測(cè)盤（定量孔板）進(jìn)行封膜，36 ℃±1℃培養(yǎng)24h；

第四步、定量檢測(cè)盤（定量孔板）結(jié)果判讀：

        無(wú)色=陰性

        黃色格子=總大腸菌群陽(yáng)性

黃色+熒光格子=大腸埃希氏菌群陽(yáng)性

查對(duì)照MPN表計(jì)數(shù)

注：耐熱大腸群菌（糞大腸菌群）需44.5℃培養(yǎng)24h后，觀察黃色格子為陽(yáng)性結(jié)果，查對(duì)照MPN表計(jì)數(shù)。