生物安全柜是防止操作處理過程中某些含有危險性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負壓安全裝置。其工作原理主要是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負壓狀態(tài)，通過垂直氣流來保護工作人員，外界空氣經(jīng)空氣過濾器過濾后進入安全柜內(nèi)，以避免處理樣品被污染，柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過HEPA過濾器過濾后再排放到大氣中，以保護環(huán)境。

生物安全柜的檢測內(nèi)容和方法

生物安全柜在安裝時以及以后每隔一定時間，要由有資質(zhì)的專業(yè)職員按照規(guī)定對每一臺生物安全柜的整體運行性能進行生物的和物理的認證，以檢查其是否符合國家及的性能標準。生物安全柜的檢測主要包括物理學(xué)檢測喝生物學(xué)檢測兩個方面，其中：

生物安全柜防護效果的物理學(xué)評估應(yīng)該包括:

    ①.安全柜的整體、HEPA過濾器的泄漏,

    ②.空氣向下活動的速率、進口空氣的速率,

    ③.負壓/換氣次數(shù),

    ④.氣流的穩(wěn)定性（煙霧特征）,

    ⑤.以及警報和自控（互鎖）系統(tǒng).

    ⑥.漏電

    ⑦.照度

    ⑧.紫外線強度

    ⑨.噪聲

    ⑩.震動性的測試。

    生物學(xué)評估包括:

    ①.對個體保護效果

    ②.對環(huán)境保護效果

    ③.樣品保護試驗

    ④.交叉污染試驗。

    4.1下列情況之一時，必須對生物安全柜進行現(xiàn)場檢測

    1）實驗室施工，生物安全柜搬到位置后。

    2）生物安全柜移動位置時。

    3）生物安全柜進行檢驗后。

    4）生物安全柜更換過濾器后。

    5）生物安全柜的一年一度的常規(guī)檢測。

    4.2 I級別生物安全柜的檢測

    4.2.1密閉性檢測

    4.2.2排風(fēng)濾器的檢測

    1）  HEPA 濾器泄漏檢測，安全柜在正常的使用條件下用正確方法進行。

    2） 多分散DOP或相當(dāng)?shù)臍馊苣z通過率不大于0.01%。

    4.3 II級生物安全柜檢測

    4.3.1原則

     進口的II級安全柜必須符合生產(chǎn)國相應(yīng)標準，如：美國、加拿大標準NSF49,英國標準BS5726,德國標準DIN12950-10,法國標準NF X44201,澳大利亞標準AS2252.2等。

    國產(chǎn)的II級生物安全柜生產(chǎn)廠家必須制定相應(yīng)的企業(yè)標準，其性能指標不低于國外同類產(chǎn)品標準。出廠時必須按企業(yè)標準對每臺生物安全柜進行檢測并出具檢測報告，使用微生物進行的生物安全防護檢測不得省略。對于每個產(chǎn)品應(yīng)提供產(chǎn)品性能數(shù)據(jù)單。質(zhì)量控制試驗應(yīng)包括：

    4.3.2 煙霧試驗：

    用發(fā)煙器械發(fā)煙，對煙的活動作直觀判定。

    1）在工作面中線上方高于工作窗口上沿15cm處，從一端到另一端發(fā)煙，煙的活動應(yīng)為向下垂直流線，無逆流，不得有死角和回流，也無煙霧從安全柜溢出。

    2）距工作窗口0.04m沿窗口外沿同樣發(fā)煙，煙流向柜內(nèi)活動無溢出，工作表面無煙霧。

    3） 如為推拉式工作窗口，沿工作窗口的外周邊發(fā)煙，煙流向內(nèi)，無逆流無溢出，工作面無煙霧。

    4.3.3氣流速度測定

    4.3.3.1垂直送風(fēng)氣流速度測定

    1）儀器：正確度為讀數(shù)±3%的風(fēng)速儀（alno8500型熱球）。

    2）方法：柜內(nèi)送風(fēng)口下方的15m處，均勻布點。測點間距不大于12cm.測點布置不少于3行，靠內(nèi)壁的那行距內(nèi)壁15cm,每行數(shù)不少于7個測點。

    3判定：垂直氣流均勻區(qū)所測均勻風(fēng)速是0.38m/s±0.025m/s,單點風(fēng)速與所測均勻風(fēng)速之差不大于20%為合格。

    4.3.3.2正面窗口進風(fēng)的風(fēng)速測定

    用計算方法或?qū)崪y方法測出進口的風(fēng)速。  

    所丈量或計算的進風(fēng)的風(fēng)速與生產(chǎn)廠家給定值之差小于0.025m/s為合格。

    A1型為0.38m/s±0.025m/s.工作表面每0.3m寬，每秒的zui小氣流量應(yīng)是0.002m³.

    A2型為0.5m/s±0.025m/s. 工作表面每0.3m寬，每秒的zui小氣流量應(yīng)是0.03m³.

    B1和B2型為0.5m/s±0.025m/s. 工作表面每0.3m寬，每秒的zui小氣流量應(yīng)是0.03m³.

    4.3.4 過濾器檢漏試驗

    4.3.4.1送風(fēng)垂直HEPA和過濾器室和框架泄露試驗

    1）送氣HEPA的密閉四周、濾器室和濾器介質(zhì)要用激光粒子計數(shù)器掃描法檢測。無漏點，透過率不可超過0.01% 或潔凈度達到100級.

    2）用瓊脂平皿沉積法檢測，潔凈度達到100級為合格。

    4.3.4.2排風(fēng)HEPA及過濾器室和框架泄露試驗

    4.3.4.2安全泄漏試驗

    打氣檢漏 試驗前使生物安全柜處于全封閉狀態(tài)，即將風(fēng)管和工作窗口封閉（可用密封膠帶密封）。靜態(tài)（斷電）時對生物安全柜內(nèi)部充氣加壓至500Pa，觀察壓力保持情況。壓力30分鐘下降小于10%為合格?；蛘咦鞣试砼菰囼灍o漏點。

    4.3.4.3排風(fēng)HEPE檢漏和透過率試驗

    1） 用激光粒子計數(shù)器，對排風(fēng)的HEPE及其附屬的濾器室和支架等進行檢漏和透過率檢測, 沒有漏點，0.3≧μm粒子的透過率<0.01%為合格。

    2） 生物氣溶膠檢測 用間接噴霧器把1-8×10^-8濃度的懸液枯草芽胞或黏質(zhì)沙雷氏菌發(fā)生氣溶膠，在安全柜正常工作情況下于HEPA上游攻擊，用2級安德森生物氣溶膠采樣器進行常規(guī)采樣,上游采樣濃度>300pfu/m³,在下游采樣結(jié)果陰性或不超過1pfu/ m³為合格。

    4.3.5產(chǎn)品、個人、環(huán)境保護和交叉污染的生物試驗

    必須用生物氣溶膠考驗安全柜的防護性能，包括下述內(nèi)容。

    4.3.5.1個人保護試驗

    1） 一種方法是 在規(guī)定參數(shù)條件下運轉(zhuǎn)中，在工作面中心上方35cm,觀察窗的里面10cm的地方，用噴霧器霧化30ml懸液枯草芽胞或黏質(zhì)沙雷式菌，噴霧方向朝外，懸液細菌的濃度為10⁸個/ml。4個安德森生物氣溶膠采樣器，布置在開口中心模擬工作的一個圓柱體（軸線距工作面7.0cm,模擬1個手臂）的上下左右，距進進工作開口250Cm.處進行采樣，試驗進行30分鐘，全部采樣器采集的細菌不超過10個（cfu）, 試驗重復(fù)進行3次。柜內(nèi)對照一個平皿收到300pfu以上。細菌氣溶膠粒子中值質(zhì)量直徑應(yīng)在0.5mm ～3.0mm之間。

    2） 另按一種方法 在圓柱體四周放4個AGI，采樣進口在安全柜的前面距觀察窗6.3cm。其中2個AGI相距15cm,在圓柱體上面水平切面上，另外2個AGI-30相距5cm，在圓柱體下面2.5cm,處。另外2個2級安德森空氣微生物采樣器放在2側(cè)，進氣口水平面上，間隔操縱口15cm，間隔側(cè)壁20cm。2個AGI放在進氣口水平工作面上方36cm,安全柜邊沿外面5cm處，.每一個間隔中心15cm.）.

    AGI所有的采樣液體用47mm,0.22的濾膜過濾，貼在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上培養(yǎng)24-28h,假如陰性繼續(xù)觀察到44-48h.

    對于新型和重要改進的安全柜，上述試驗應(yīng)在下列條件下進行：在原本進進氣流流速減往0.05±0.015m/s，在原本向下氣流流速加上和減往0.05±0.015m/s, 氣流流速用儀器直接丈量。每臺安全柜都應(yīng)作氣流檢測。

    在作向下氣流調(diào)整時要用全部丈量的均勻速度。

    在確定向下和進進氣流速度時應(yīng)避免使用不適合的儀器。對于新的和做了修改設(shè)計的產(chǎn)品應(yīng)對進進和向下氣流速度減往0.05±0.015m/sd 情況下重復(fù)上面的步驟。

    合格標準：

    每個試驗6 只AGI收到細菌不超過10pfu,2個裂隙采樣器30分鐘收到的不超過5pfu.試驗重復(fù)3次，對照都應(yīng)陽性，一個平皿超過300個pfu.

    4.3.5.2產(chǎn)品保護試驗

    全部的工作面，放上沉降平皿。噴霧器放在距觀察窗底部外沿102 mm處，方向朝觀察窗，細菌濃度為（1-8）×10^-6。一個圓柱體放在噴霧器下面50mm處，模擬1個手臂。試驗進行5分鐘，柜內(nèi)沉降平皿收到的菌落數(shù)不超過5個，試驗需重復(fù)3次。

    4.3.5.3交叉污染試驗

    柜內(nèi)全部工作面放上沉降平皿。噴霧器放在距工作面上方76-127mm，以一側(cè)壁為背景向另一側(cè)噴霧，細菌濃度為（1-8）×10^-4。試驗進行5分鐘，結(jié)果在超過距攻擊一側(cè)356mm的平皿中不超過2個cfu. 2側(cè)攻擊均需3次。

    4.3.5.4環(huán)境保護試驗

     在上述攻擊試驗的同時在安全柜排風(fēng)口用一臺2級安德森采樣器采樣30分鐘，收到的試驗菌不得超過2個cfu。

    4.3.6.穩(wěn)定性試驗

    對II級生物安全柜應(yīng)作抗顛倒和扭曲試驗

    4.3.6.1.抗顛覆 按照UL 3101的第七部分執(zhí)行

    4.3.6.2當(dāng)在接近頂部邊沿（反面）橫向施以110kg力時，在頂部前沿和側(cè)面頂部向前移位不超過1.6mm.

    4.3.6.3工作表面抗壓力 在工作表面中心25×25cm的面積內(nèi)均勻分布23kg重量，工作表面沒有偏斜。

    4.3.6.4抗偏斜  110kg放在柜的邊沿處，后面底部抬高不超過1.6mm.

    4.3.7生產(chǎn)廠家應(yīng)提供資料

    每一臺生物安全柜的說明書中應(yīng)有產(chǎn)品質(zhì)量控制數(shù)據(jù)資料。

    1） 壓力降/肥皂泡/識別氣體檢漏，

    2） 個人保護，產(chǎn)品保護檢測資料

    3） 環(huán)境保護檢測資料

    4.4其它檢測

    1） 溫升 工作4小時柜內(nèi)溫升不超過8.5⁰C.

    2） 光照度 柜內(nèi)均勻照度650 Lux。個人讀（眼）處不低于430Lux.

    3） 噪音水平  在正常工作狀態(tài)時，工作面上方38cm,，操縱口外面30cm處的噪聲，（在zui大背景噪聲為57db）不超過67db

    4） 振動 在正常設(shè)定參數(shù)下工作，工作面中心10Hz-10kHz的振動頻率的振幅凈位移不超過2×10^-4 in（5×10-6 m）rms。

    5） 漏電檢測 接地電阻和電極性試驗。

    6） 水漕漏水試驗 4升水1 小時肉眼看不到漏。

    7） 風(fēng)機性能 在設(shè)定風(fēng)速在沒有調(diào)控的情況下，壓力降低50%,新濾器進風(fēng)量減少不超過10%

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