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JM110感受態(tài)細(xì)胞特點，JM110感受態(tài)細(xì)胞實驗注意事項

閱讀：1261發(fā)布時間：2016-12-1

JM110感受態(tài)細(xì)胞特點: 一種琥珀抑制型 F’重組缺陷菌株。支持 M13 噬菌體載體的生長，對轉(zhuǎn)染的 DNA 有修飾作用，但 無限制作用。該菌株中的 F’帶有 lacZΔM15，后者使得與在 λZAP 中編碼的 β-半乳糖 苷酶氨基端進(jìn)行 α-互補(bǔ)， 可用于藍(lán)白斑篩選。

JM110感受態(tài)細(xì)胞實驗注意事項：
1. 感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在-80℃，不可反復(fù)凍融，否則其轉(zhuǎn)化效率將會降低。
2. 實驗過程中應(yīng)嚴(yán)格無菌操作，防止其它 DNA 或雜菌的污染，避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。
3. 轉(zhuǎn)化時，轉(zhuǎn)化效率與外源 DNA 的濃度在一定范圍內(nèi)成正比，但當(dāng)加入的外源 DNA 量過多或體積過大反而會降低轉(zhuǎn)化效率。轉(zhuǎn)化時 DNA 體積要小于感受態(tài)細(xì)胞體積的十分之一。
4. 轉(zhuǎn)化率的計算：轉(zhuǎn)化率＝產(chǎn)生菌落的總數(shù)/鋪板 DNA 總量。
5. 為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功，可以保留部分連接產(chǎn)物，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到zui低。

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