022240 克氏雙糖鐵培養(yǎng)基
(Kligler Iron Agar)
用 途:
克氏雙糖鐵瓊脂用于鑒別腸道菌發(fā)酵葡萄糖和乳糖,及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(GB/T4789.28-2003 中4.29,GB/T4789.6-2003)。
原 理:
蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、維生素、礦物質(zhì);乳糖、葡萄糖為可發(fā)酵糖類,其產(chǎn)酸時通過酚紅指示劑測出,酸性呈黃色,堿性呈紅色;可被某些細菌還原為硫化氫,與鐵鹽生成黑色硫化鐵;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。各種革蘭氏陽性桿菌也可生長及產(chǎn)生硫化氫。
培養(yǎng)基配方(每升):
蛋白胨 20g
牛肉膏粉 3g
酵母膏粉 3g
乳糖 10g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
檸檬酸鐵銨 0.5g
0.5g
瓊脂 12g
酚紅 0.025g
最終pH 7.4±0.2
使用方法:
1、稱取克氏雙糖鐵瓊脂55g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝試管(裝量宜多些),121℃高壓滅菌15min,制成高層斜面,待冷卻后,備用。
2、挑取待檢菌的新鮮培養(yǎng)物,穿刺接種混合克氏雙糖鐵瓊脂斜面。接種時先在斜面劃線,然后再穿刺底層,反之亦可。(應注意不要在分離平板上菌落密集的部位挑取可疑菌落,而應在菌落稀疏部位挑取單個菌落。)
3、將試管放入培養(yǎng)箱內(nèi)36±1℃培養(yǎng)18—24h。
4、觀察結果。觀察斜面與底層的反應情況。
質(zhì)量控制:
配成的培養(yǎng)基為紅色,下列菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)24h結果如下:

注:“A"為產(chǎn)酸,“K"為產(chǎn)堿。
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格:250g
參考文獻:
1.GB/T4789.6-2003 中華人民共和國國家標準食品衛(wèi)生微生物檢驗 致瀉大腸埃希氏菌檢驗
2.GB/T4789.28-2003中華人民共和國國家標準 食品衛(wèi)生微生物檢驗 染色法,培養(yǎng)基和試劑