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022169乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基(藥典)(MacConkeyAgar)用途:乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基用于多管發(fā)酵法測定食品、藥品、純凈水、礦泉水和一次性使用衛(wèi)生用品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌(GB/T8538-2008和GB15979-2002,中華人民共和國藥典2010年版)
022169 乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基(藥典)
(MacConkey Agar)
用 途:
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基用于多管發(fā)酵法測定食品、藥品、純凈水、礦泉水和一次性使用衛(wèi)生用品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌(GB/T 8538-2008和GB15979-2002,中華人民共和國藥典2010年版)。
原 理:
胨提供碳源和氮源滿足細(xì)菌生長的需求;牛膽鹽可抑制革蘭氏陽性細(xì)菌的生長;乳糖是大腸菌群可發(fā)酵的糖類;溴甲酚紫是pH指示劑,酸性呈黃色,堿性呈紫色。
配方(每升):
胨 20.0g
牛膽鹽 5.0g
乳糖 10.0g
溴甲酚紫 0.01g
使用方法: 最終pH 7.4±0.2
1、 稱取乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基35克(單料)加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝于帶有小倒管的試管中,培養(yǎng)基每管10mL,115℃高壓滅菌15min。
2、 樣品的處理及稀釋。略。
3、 (1)食品:取1mL稀釋液,加入到含有10mL乳糖膽鹽培養(yǎng)基的試管中,根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì),選取三個(gè)合適的稀釋度每個(gè)稀釋度接種三管。將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi),接種量在1mL以上者,用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管,1mL及1mL以下者,用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。
(2) 一次性使用衛(wèi)生用品:取樣液5mL接種50mL單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。
(3)藥品:取不少于10ml的乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)管3支,分別加入1:10的供試液1ml;1:100的供試液1ml;1:1000的供試液1ml,另取1支乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管加入稀釋液1ml作為陰性對照管。
4、 將試管放入到培養(yǎng)箱中36±1℃培養(yǎng)24h;藥品放入30~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18~24h。
5、 觀察結(jié)果。如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣,則可報(bào)告為大腸菌群陰性,如有產(chǎn)氣者,則要進(jìn)行分離、證實(shí)試驗(yàn)。
質(zhì)量控制:
配成的培養(yǎng)基呈紫色,質(zhì)控菌株接種后,于36±1℃培養(yǎng)24h或者30~35℃培養(yǎng)18~24h結(jié)果如下:
菌 名 | 菌 號 | 生長狀況 | 產(chǎn)酸 | 產(chǎn)氣 |
大腸埃希氏菌 | ATCC25922 | 良好 | + | + |
ATCC6538 | 被抑制 | — | — |
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格:250g
參考文獻(xiàn):
1. 《中華人民共和國藥典》2010年版,附錄XI J 微生物限度檢查。
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