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廣東環(huán)凱生物科技有限公司
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022020營(yíng)養(yǎng)瓊脂(普通斜面培養(yǎng)基)(NutrientAgar)用途:營(yíng)養(yǎng)瓊脂(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基)用于細(xì)菌總數(shù)測(cè)定、保存菌種及純培養(yǎng),也可用于消毒效果測(cè)定(GB/T4789.28-2003中4.7,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO標(biāo)準(zhǔn))
022020營(yíng)養(yǎng)瓊脂(普通斜面培養(yǎng)基)
(Nutrient Agar)
用 途:
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基)用于細(xì)菌總數(shù)測(cè)定、保存菌種及純培養(yǎng),也可用于消毒效果測(cè)定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO標(biāo)準(zhǔn))。
【檢驗(yàn)原理】
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
【配方成分】
配方(每升) 含量
蛋白胨 10g
牛肉膏粉 3g
氯化鈉 5g
瓊脂 15g
最終pH 7.3±0.2
【使用方法】
1、稱取本品33g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。
2、(食品)以無(wú)菌操作稱取檢樣25克(或25mL),放入含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中(瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠),充分振搖,即為1:10的均勻稀釋液。依次做1:100,1:1000……稀釋液。
3、根據(jù)對(duì)樣品污染情況的估計(jì),選擇2—3個(gè)合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時(shí),吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中,每個(gè)稀釋度做2個(gè)平皿。
4、稀釋液移入平皿后應(yīng)及時(shí)將涼至46℃左右的培養(yǎng)基注入平皿約15mL,并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻,同時(shí)將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。待瓊脂凝固后,倒置于36±1℃溫箱中培養(yǎng)48±2h。
5、觀察結(jié)果。
6、菌落計(jì)數(shù)方法:
做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí),可用肉眼觀察,必要時(shí)用放大鏡檢查,以防遺漏,在計(jì)下各平板的菌落數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。
7、菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告:
選取菌落數(shù)在30—300之間的平板作為菌落總數(shù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板,應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù),其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí),則不宜采用,而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù),若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有我鏈狀菌落生長(zhǎng)時(shí)(菌落之間無(wú)明顯界線),若僅有一條鏈,可視為一個(gè)菌落;如有不同來(lái)源的幾條鏈,則應(yīng)將每條鏈視為一個(gè)菌落計(jì)
A:稀釋度的選擇:
應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30—300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)附表)。
若有兩個(gè)稀釋度.其生長(zhǎng)的菌落數(shù)無(wú)均在30—300之間,則視兩者之比如何來(lái)決定。若其比值小于或等于2,則應(yīng)報(bào)告其平均數(shù);若大于2則報(bào)告其較小的數(shù)字(見(jiàn)表中例2及3)。
若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300則應(yīng)按稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)表中例4)。
若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則應(yīng)按稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)表中例5)。
若所有稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)表中例6)。
若有稀釋度的平均菌菌落數(shù)均不在30—300之間,其中一部分大于300或小于30時(shí),則以30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)表中例7)。
菌落數(shù)的報(bào)告:
菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí),按其實(shí)有數(shù)報(bào)告,大于100時(shí),采用二位有效數(shù)字,在二位數(shù)字后面的有效數(shù)值,以四舍五入法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù),也可以用10的指數(shù)來(lái)表示(見(jiàn)表中“報(bào)告方式欄")。
【質(zhì)量控制】
1. 外觀方面
淡黃色顆粒,高壓滅菌后呈淡黃色透明無(wú)沉淀,傾注平皿冷卻后呈淡黃色凝膠。
2. 生物學(xué)方面
下列質(zhì)控菌株接種待測(cè)試培養(yǎng)基,36℃±1℃培養(yǎng)18~24h,結(jié)果如下:
【儲(chǔ)存條件及保質(zhì)期】
貯存于避光、陰涼干燥處;貯存期三年。
【注意事項(xiàng)】
1、稱量時(shí)注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。
2、自制平板時(shí)需注意培養(yǎng)基的厚度,厚度過(guò)薄容易造成瓊脂水分保持性下降,開(kāi)裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養(yǎng)基,平板培養(yǎng)基厚度至少為2mm。
3、質(zhì)檢報(bào)告可以登錄環(huán)凱網(wǎng)站,打開(kāi)“客服中心"頁(yè)面,輸入產(chǎn)品批號(hào)下載。
【廢物處理】
檢測(cè)之后帶菌平板置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
【執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】
Q/HKSJ 03 普通微生物培養(yǎng)基
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