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大鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒使用說明書

閱讀:230發(fā)布時間:2013-7-29

大鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒使用說明書

Elisa kit規(guī)格:48孔配置/96孔配置

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶

酶標(biāo)試劑:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)

【大鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒】本試劑僅供研究使用

計算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

試劑盒組成:

封板膜:2片(48)/2片(96)

說明書:1份

密封袋:1個

標(biāo)準(zhǔn)品:   2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶  2-8℃保存

酶標(biāo)包被板:  1×48     1×96         2-8℃保存

樣品稀釋液: 3ml×1瓶  6 ml×1瓶     2-8℃保存

顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶     2-8℃保存

顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶     2-8℃保存

終止液:     3ml×1瓶 6ml×1瓶     2-8℃保存

濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶   2-8℃保存

實驗原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠β細(xì)胞素(BTC)水平。用純化的大鼠β細(xì)胞素(BTC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A),再與HRP標(biāo)記的抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠β細(xì)胞素(BTC)濃度。

目的:本試劑盒用于測大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)的含量。

服務(wù)承諾:

供貨期:款到發(fā)貨。
工作時間內(nèi)免費的技術(shù)咨詢和指導(dǎo) 。請
為客戶提供來樣檢測服務(wù),zui大限度實驗結(jié)果的有效性(免費代測)。

保存條件及有效期:

試劑盒保存:2-8℃| 有效期:6個月

【大鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒】樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


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