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上海酶聯(lián)生物研究所
上海酶聯(lián)生物研究所
閱讀：340發(fā)布時間：2012-7-11
日前，雜志《病毒學(xué)雜志》（Journal of Virology）在線發(fā)表了*上海巴斯德研究所周保羅研究組關(guān)于艾滋病病毒I型（HIV-1）疫苗的成果：一種基于果蠅S2細(xì)胞的新型HIV-1 病毒樣顆粒（VLP）表達(dá)系統(tǒng)。這是世界上報道采用果蠅S2細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)制備HIV-1 VLP作為艾滋病疫苗組分。
2009年在泰國完成的RV144 HIV疫苗實驗雖然獲得了31.2%的保護(hù)率，但是仍然不能用于人群接種，該疫苗采用痘病毒載體初免，GP120蛋白加強。一個成功的HIV-1疫苗應(yīng)既能夠誘導(dǎo)出HIV-1胞膜蛋白特異性的廣譜中和抗體，又能夠誘導(dǎo)出多種蛋白特異性的T細(xì)胞免疫反應(yīng)。在眾多的HIV-1免疫原設(shè)計中，VLP由于能夠?qū)⑻烊粯?gòu)象的胞膜蛋白刺突展示于其表面，并且能夠同時誘導(dǎo)體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)而被認(rèn)為優(yōu)于GP120蛋白。但是，目前的HIV-1 VLP表達(dá)系統(tǒng)在某些方面還存在缺陷。
為了克服這些缺陷，博士研究生楊立飛、宋宇峰等在周保羅研究員的指導(dǎo)下，開發(fā)出一種基于果蠅S2細(xì)胞的新型HIV-1 VLP表達(dá)系統(tǒng)。首先，他們構(gòu)建了表達(dá)HIV-1 VLP的S2細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)克隆；然后研究了該系統(tǒng)表達(dá)的VLP胞膜蛋白的表達(dá)、剪切、組裝以及糖基化等理化特征，并且采用冷凍電鏡（Croy-EM）和冷凍電子斷層成像（Croy Electron Tomography）對VLP的形態(tài)學(xué)及其表面刺突的數(shù)量進(jìn)行了仔細(xì)分析；zui后研究了VLP的抗原性和免疫原性。
研究表明，采用這一新型VLP表達(dá)系統(tǒng)制備的HIV-1 VLP其表面膜蛋白能夠正確剪切、糖基化并且和gag蛋白一起組裝成病毒樣顆粒；采用該系統(tǒng)制備的HIV-1 VLP產(chǎn)量與桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的產(chǎn)量相當(dāng)，甚至更高。Cryo-EM和Tomography研究發(fā)現(xiàn)，純化后的VLP表面平均包含17個膜蛋白刺突，并且保留了多個已知的廣譜中和抗體表位。研究人員采用DNA初免-VLP加強，并伴以CpG佐劑的接種策略，可以在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)出胞膜蛋白特異性的抗體反應(yīng)：包括ELISA結(jié)合抗體、中和抗體、ADCC和ADCVI特異性抗體反應(yīng)，以及胞膜蛋白和gag特異性的CD8 T細(xì)胞免疫反應(yīng)等，具有更好的免疫保護(hù)效果。綜上所述，這一新型VLP表達(dá)系統(tǒng)制備的HIV-1 VLP具有很多優(yōu)良的特性，可以開發(fā)成為HIV-1疫苗的有效組分。
該研究是與中科院生物物理研究所朱平研究組合作完成的，得到了國家科技重大專項的資助。
商鋪：http://www.hg1112.cn/st32881/
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