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公司動(dòng)態(tài)

微生物大小的測(cè)定

閱讀:881發(fā)布時(shí)間:2010-1-27

一、基本原理
  微生物細(xì)胞大小,是微生物的形態(tài)特征之一,也是分類(lèi)鑒定的依據(jù)之一。由于菌體很小,只能在顯微鏡下測(cè)量。用來(lái)測(cè)量微生物細(xì)胞大小的工具有目鏡測(cè)微尺(圖Ⅳ-4)和鏡臺(tái)測(cè)微尺(圖Ⅳ-5)。
  鏡臺(tái)測(cè)微尺(圖Ⅳ-5)是*部分刻有等分線的載玻片。一般將1mm等分為100格(或2mm等分為200格),每格長(zhǎng)度等于0.01mm(即106μm)。是于校正目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度的。
  目鏡測(cè)微尺(圖Ⅳ-4,A)是一塊可放在接目鏡內(nèi)的隔板上的圓形小玻片,其*刻有的刻度,有等分50小格或100小格兩種,每5小格間有一長(zhǎng)線相隔。由于所用接目鏡放大倍數(shù)和接物鏡放大倍數(shù)的不同,目鏡測(cè)微尺每小格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度也就不同,因此,目鏡測(cè)微尺不能直接用來(lái)測(cè)量微生物的大小,在使用前必須用鏡臺(tái)測(cè)微尺進(jìn)行校正,以求得在一定放大倍數(shù)的接目鏡和接物鏡下該目鏡測(cè)微尺每小格的相對(duì)值,然后才可用來(lái)測(cè)量微生物的大小。
二、器材
  枯草芽孢桿菌染色玻片標(biāo)本,目鏡測(cè)微尺,鏡臺(tái)測(cè)微尺,顯微鏡,擦鏡紙,香柏油等。
三、操作步驟
  1.目鏡測(cè)微尺的標(biāo)定
  (1)放置目鏡測(cè)微尺取出接目鏡,旋開(kāi)接目鏡透鏡,將目鏡測(cè)微尺的刻度朝下放在接目鏡筒內(nèi)的隔板上(圖Ⅳ-4,B),然后旋上接目透鏡,zui后將此接目鏡插入鏡筒內(nèi)(圖Ⅳ-4,C)。
 ?。?)放置鏡臺(tái)測(cè)微尺將鏡臺(tái)測(cè)微尺置于顯微鏡的載物臺(tái)上,使刻度面朝上。
 ?。?)校正目鏡測(cè)微尺先用低倍鏡觀察,對(duì)準(zhǔn)焦距,當(dāng)看清鏡臺(tái)測(cè)微尺后,轉(zhuǎn)動(dòng)接目鏡,使目鏡測(cè)微尺的刻度與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度平行,移動(dòng)推動(dòng)器,使目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺的某一區(qū)間的兩對(duì)刻度線*重合,然后計(jì)數(shù)出兩對(duì)重合線之間各自所占的格數(shù)(圖Ⅳ-6)。
  根據(jù)計(jì)數(shù)得到的目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺重合線之間各自所占的格數(shù),通過(guò)如下公式換算出目鏡測(cè)微尺每小格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度。
  目鏡測(cè)微尺每小格長(zhǎng)度(μm)=
  同法校正在高倍鏡和油鏡下目鏡測(cè)微尺每小格所代表的長(zhǎng)度。
  2.菌體大小的測(cè)定
  目鏡測(cè)微尺校正后,移去鏡臺(tái)測(cè)微尺,換上枯草芽孢桿菌染色玻片標(biāo)本,校正焦距使菌體清晰,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺(或轉(zhuǎn)動(dòng)染色標(biāo)本),測(cè)出枯草芽孢桿菌的長(zhǎng)和寬各占幾小格,將測(cè)得的格數(shù)乘以目鏡測(cè)微尺每小格所代表的長(zhǎng)度,即可換算出此單個(gè)菌體的大小值,在同一涂片上需測(cè)定10至20個(gè)菌體,求出其平均值,才能代表該菌的大小。而且一般是用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌體來(lái)進(jìn)行測(cè)定。
  3.取出目鏡測(cè)微尺,將接目鏡放回鏡筒,再將目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺分別用擦鏡紙擦拭后,放回盒內(nèi)保存。
四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告
(1)將目鏡測(cè)微尺校正結(jié)果填入下表。
(2)在高倍鏡下測(cè)量枯草芽孢桿菌大小結(jié)果填入下表。
 


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