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勁馬實(shí)驗(yàn)步驟之緩沖液的配制

2015-4-9  閱讀(1302)

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                                            勁馬實(shí)驗(yàn)步驟之緩沖液的配制 

上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司按化定義緩沖溶液是由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液,能在一定程度上抵消、減輕外加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿對溶液酸度的影響,從而保持溶液的pH值相對穩(wěn)定。這種溶液稱為緩沖溶液。在生化研究工作中,常常需要使用緩沖溶液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果“提取酶"實(shí)驗(yàn)體系的pH值變動或大幅度變動,酶活性就會下降甚至*喪失。所以配制緩沖溶液是一個*的關(guān)鍵步驟。一起跟隨小編來看看以下步驟吧!讓您更多的了解緩沖溶液的配置情況。

(一)緩沖液的組成緩沖液的組成        
緩沖液是臨床生化診斷試劑的重要組成部分。由于它對外來的H+和OH-有雙向調(diào)節(jié)作用,因而能為酶試劑中的待測物質(zhì)反應(yīng)提供zui適pH,以利于這些酶zui大限度地發(fā)揮其催化效能;也為以酸堿指示染料作為顯色劑的試劑提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,以保證這些試劑和方法有準(zhǔn)確可靠的測定結(jié)果。

一般的緩沖劑都由一共軛酸及一共軛堿組成?!八嵝?緩沖液含有一弱酸及其鹽(共軛堿);“堿性"緩沖液含有弱堿及其鹽(共軛酸)。共軛酸和共軛堿一起可阻止溶液pH發(fā)生劇烈的變化。當(dāng)向溶液中加入H+時,共軛堿可與之部  分地結(jié)合而共軛酸,H+不再成游離狀態(tài)存在;當(dāng)加入OH-時,則共軛酸與之結(jié)合水及共軛堿,使OH-不再以游離狀態(tài)存在而影響溶液的酸堿度。

(二)緩沖液的緩沖容量緩沖液的緩沖容量        
緩沖液維持pH恒定的效力取決于其緩沖容量的大小。緩沖容量是指使1L溶液的pH改變個1pH單位所需要的酸或堿量(mol)。緩沖容量決定于鹽與酸(或堿)的真實(shí)濃度及兩者的比值。緩沖液的濃度越高,緩沖容量越大。一般的緩沖液總濃度在0.05~0.2mol/L之間。當(dāng)總濃度固定時,鹽與酸(或堿)的比值為1時,其緩沖容量zui大;如果兩者比值相差10倍以上時,則緩沖容量將大為減小。在實(shí)際工作中,不能無限制地加大緩沖液的濃度來增加其緩沖容量,因?yàn)辂}類濃度過高將抑制酶的活性,對電泳分離也有不利的影響。
被稀釋或加入中性鹽時,其pH能基本維持恒定。在一般情況下,將緩沖液稀釋1倍,其pH值只改變一個pH單位的百分之幾;加入0.1mol/L中性鹽溶液,只使pH值大約改變0.1。但是溫度的改變不可忽視,如0.025mol/L混合磷酸鹽緩沖液(用GR磷酸二氫鉀3.4g,GR磷酸氫二鈉3.55g,溶解于雙蒸餾水至1000ml),在5℃時pH為6.95,15℃時為6.90,25℃時為6.86,35℃時為6.84。故對pH要求精密時必須注意做溫度補(bǔ)償,以消除由于不同溫度所產(chǎn)生的測定誤差。 

(三)配制緩沖液的注意事項(xiàng)配制緩沖液的注意事項(xiàng)  
1.所有試劑選用分析純或優(yōu)級純,并必須恒重后方能配制。具體的恒重方法因試劑種類而有不同,如:①琥珀酸、甘氨酸、巴比妥及其鈉鹽放在氯化鈣干燥器中至恒重;②用檸檬酸鈉(含2H2O)及檸檬酸(含H2O)不需恒重直接配制其溶液;③無水醋酸鈉,在100℃下干燥3h。④醋酸溶液用分析冰醋酸直接配制,然后再用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行標(biāo)定。 
2.所用儀器必須清潔,容量儀器經(jīng)過校正,以保證準(zhǔn)確。 
3.配好的緩沖液必須用酸度計(jì)校正其pH值(準(zhǔn)確至小數(shù)點(diǎn)后兩位)。如對其濃度有懷疑時,則應(yīng)用滴定法檢查其濃度。

上海勁馬生物代理銷售sigma緩沖試劑,擁有著多年銷售經(jīng)驗(yàn),咨詢具體報價。

以下是緩沖試劑部分試劑展示:

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三羥甲基氨基甲烷/緩血酸銨/三(羥甲基)氨基甲烷/2-氨基-2-(羥甲基)-1,3-丙二醇/氨丁三醇/*醇氨基甲烷/氨基丁三醇/三羥基甲基氨基甲烷/TRIS/Tris-base/THAM
雙[三(羥甲基)氨基甲烷]/二(2-羥乙基)亞氨基三(羥甲基)甲烷/雙(2-羥乙基)氨基(三羥甲基)甲烷/2,2-雙二羥甲基苯胺/雙(2-羥乙基)-三羥甲基氨基甲烷/N,N'-二羥基乙基-亞氨基-三羥基甲基氨基甲烷/雙(2-羥乙基)胺三(羥甲基)甲烷/BIS-TRIS
雙[三(羥甲基)氨基丙烷]/1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷/BIS-TRIS 丙烷/1,3-雙[ (三羥甲基)甲基氨基]丙烷/雙三羥基甲氨基丙烷/BIS-TRIS propane
三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽/三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽/2-氨基-2-羥甲基-1,3-丙二醇鹽酸鹽/TRIS-HC1
三羥甲基氨基甲烷乙酸鹽/三羥甲基氨基甲烷醋酸鹽/TRIS醋酸鹽/三(羥甲基)氨基甲烷醋酸鹽/醋酸*醇氨基甲烷/TRIS acetate salt
三羥甲基氨基甲烷碳酸鹽/Tris carbonate
3-(環(huán)己氨基)-1-丙磺酸/3-(環(huán)己胺)-1-丙磺酸/3-(環(huán)己氨基)-1-丙烷磺酸/3-環(huán)己基氨基丙烷磺酸/CAPS
3-(環(huán)己氨基)-1-丙磺酸鈉鹽/3-(環(huán)己胺)-1-丙磺酸/3-(環(huán)己氨基)-1-丙烷磺酸鈉鹽/3-環(huán)己基氨基丙烷磺酸鈉鹽/CAPS sodium salt
3-(環(huán)己氨基)2-羥基-1-丙磺酸/3-(環(huán)己胺)2-羥基-1-丙磺酸/3-環(huán)己胺基-2-羥基丙磺酸/CAPSO
3-(環(huán)己氨基)2-羥基-1-丙磺酸鈉鹽/3-(環(huán)己胺)2-羥基-1-丙磺酸鈉鹽/CAPSO 單鈉鹽/3-(環(huán)己氨基)-2-丙磺酸鈉/CAPSO sodium salt

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