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酸性磷酸酶的顯示方法1.目的與原理實驗目的:掌握Comori法的基本原理和方法。觀察酸性磷酸酶在細胞內(nèi)的分布狀況。實驗原理:酸性磷酸酶能分解磷酸脂而釋放出磷酸基。在pH5.0的環(huán)境中,磷酸基能與鉛鹽反應形成磷酸鉛。但因其是無色的,所以再經(jīng)過與硫化銨作用,形成棕黑色的硫化鉛沉淀,由此就能顯示酸性磷酸酶在細胞內(nèi)的存在與分布。本實驗的技術特點是:(1)采用冷凍涂片和中性福爾馬林固定,可避免在固定、包埋及制片過程中酶的失活,保證了實驗的穩(wěn)定性。(2)采用較短的作用時間,可避免細胞質(zhì)內(nèi)其它蛋白質(zhì)及核內(nèi)出現(xiàn)
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一、實驗目的1.了解細胞膜對物質(zhì)通透性的一般規(guī)律。2.了解溶血現(xiàn)象及其發(fā)生機制。二、實驗原理細胞膜是細胞與環(huán)境進行物質(zhì)交換的選擇通透性屏障。它是一種半透膜,可選擇性控制物質(zhì)進出細胞。各種物質(zhì)出入細胞的方式是不同的,水是生物界zui普遍的溶劑,水分子可以按照物質(zhì)濃度梯度從滲透壓低的一側通過細胞膜向滲透壓高的一側擴散,這種現(xiàn)象就是滲透。滲透作用是細胞膜的主要功能之一。將紅細胞放在低滲鹽溶液中,水分子大量滲到細胞內(nèi),可使細胞脹破,血紅蛋白釋放到介質(zhì)中,由不透明的紅細胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液,這
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WesternBlot(免疫印跡法)步驟主要包括以下4個基本步驟:樣品制備;電泳分離;蛋白的膜轉移;免疫雜交與顯色――蛋白檢測。溶液和試劑1.1X磷酸鹽緩沖液(PBS)2.ModifiedRIPAbuffer:Tris-HCl:50mM,pH7.4;NP-40:1%;Na-deoxycholate:0.25%;NaCl:150mM;EDTA:1mM;PMSF:1mM;Aprotinin,leupeptin,pepstatin:1microgram/mleach;Na3VO4:1mM;NaF:1m
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凝膠電泳操作注意事項1.緩沖系統(tǒng):在沒有離子存在時,電導率zui小,DNA不遷移,或遷移極慢,在高離子強度的緩沖液中,電導很高并產(chǎn)熱,可能導致DNA變性,因此應注意緩沖液的使用是否正確.長時間高壓電泳時,常更新緩沖液或在兩槽間進行緩沖液的循環(huán)是可取的.2.瓊脂糖:不同廠家、不同批號的瓊脂糖,其雜質(zhì)含量不同,影響DNA的遷移及熒光背景的強度,應有選擇地使用.3.凝膠的制備:凝膠中所加緩沖液應與電泳槽中的相一致,溶解的凝膠應及時倒入板中,避免倒入前凝固結塊.倒入板中的凝膠應避免出現(xiàn)氣泡,影響電泳結果
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活細胞間接免疫熒光法實驗操作方法一.實驗器材:1.器材:40孔塑料板、40孔板離心機、微量加樣器、振蕩器、蓋玻片、熒光顯微鏡等。2.試劑:單抗隆抗體(單抗)、熒光標記抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、疊氮鈉(NaN3)等。二.方法(微量法)1.將分離好的單個核細胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分鐘。用含0.1%NaN3PBS調(diào)細胞濃度在0.5-1×108/ml(5000萬-1億/ml),加在40孔板上,每孔10ul,含5-10×105細胞,然后加入單抗(*抗體)50ul
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上海勁馬實驗設備有限公司專業(yè)供應各種種屬蛋白elisa試劑盒,提供免費代測服務,保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量100%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細信息,請來的咨詢::業(yè)務:何細胞分裂是機體發(fā)育和組織維持的基礎過程,巴塞羅那生物醫(yī)學研究所IRB和基因組調(diào)控中心CRG的一項研究證實,Nek9蛋白是細胞分裂的決定性因素。這項研究由巴塞羅那IRB研究者JoanRoig和CRG的IsabelleVernos領導,研究顯示細胞需要Nek9蛋白才能正確分配染色體,
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堿性成纖維生長因子(簡稱bFGF)是哺乳動物和人體內(nèi)存在的一種微量物質(zhì),在多種組織細胞中分布有bFGF受體,因而其生理作用廣泛,是一種多功能細胞生長因子,bFGF于1974年首先由美國科學家Gospodarowicz從牛垂體中分離出,方法復雜,價格昂貴?,F(xiàn)在運用基因工程技術,由大腸桿菌可大量表達生產(chǎn)高活性、高純度的bFGF,從而使之大規(guī)模應用于臨床。國內(nèi)外大量研究結果表明,bFGF通過促進與創(chuàng)傷修復有關的幾乎所有細胞的迅速增殖而推動創(chuàng)面主動修復,顯著縮短創(chuàng)面愈合時間,全面提高創(chuàng)傷愈合質(zhì)量,特別是
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HSP0抗原呈遞的作用HSP70家族在抗原呈遞中扮演重要的角色。在腫瘤細胞表面的HSP70可以引發(fā)針對該腫瘤細胞的特異性免疫,并與DC(樹突狀細胞)抗腫瘤作用有關[6]。腫瘤細胞自身呈遞抗原效率非常低下,原因在于腫瘤細胞MHCI類分子往往低表達以及共同刺激分子缺乏,因此具有腫瘤特異性的CD4+和CD8+淋巴細胞的激活必須依賴于抗原提呈細胞的幫助,在由抗原呈遞細胞將內(nèi)源性抗原和外源性抗原,經(jīng)MHCⅠ類分子途徑和MHCⅡ類分子途徑,分別將抗原信息呈遞給CD8+T淋巴細胞和CD4+T淋巴細胞,通過NK