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高質(zhì)量人肌紅蛋白人肌紅蛋白（MYO/MB）ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號人肌紅蛋白（MYO/MB）ELISA試劑盒

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更新時間：2018-05-07 14:23:11瀏覽次數(shù)：681次

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廈門慧嘉生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡介

廈門慧嘉生物*經(jīng)營人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒。誠信經(jīng)營，價格實惠，服務(wù)周到，質(zhì)量有保證。歡迎廣告老師來詢！: :

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱：人肌紅蛋白（MYO/MB）ELISA Kit
產(chǎn)品英文： Human Myoglobin,MYO/MB ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格： 96T
產(chǎn)品類別：人心肌梗塞類ELISA試劑盒[Human cardiomyopathy ELISA Kit

人肌紅蛋白（MYO/MB）酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究研究使用

預(yù)期應(yīng)用
ELISA法定量測定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體中MB含量。
概述
Mb是一種氧結(jié)合血紅素蛋白，分子量17，800道爾頓，主要分布于心肌和骨骼肌組織，在急性心肌梗塞（AMI）時，心肌細(xì)胞壞死，Mb稀放入血液中。在癥狀出現(xiàn)約2～3小時后，血中Mb可超出正常上限，9～12小時達(dá)到峰值，24～36小時后恢復(fù)正常。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法測定標(biāo)本中MB水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入MB、*化的抗人MB抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MB呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
試劑盒組成
1. 酶聯(lián)板：一塊（96孔）
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，其濃度為250 ng/mL，做系列倍比稀釋后，分別稀釋成250 ng/mL，125 ng/mL ，62.5 ng/mL，31.2 ng/mL，15.6 ng/mL，7.8 ng/mL，3.9 ng/mL，其原液直接作為zui高標(biāo)準(zhǔn)濃度，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 mg/mL，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
3. 樣品稀釋液：1×10ml/瓶。
4. 抗體稀釋液A：1×10ml/瓶。
5. 抗體稀釋液B：1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A：1×120ul/瓶（1：100）臨用前以抗體稀釋液A1：100稀釋。
7. 檢測溶液B：1×120ul/瓶（1：100）臨用前以抗體稀釋液B1：100稀釋。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

標(biāo)本的采集及保存
1．細(xì)胞培養(yǎng)物上清：請離心后收集上清，并將標(biāo)本保存于-20℃，且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．血清：標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3．血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。

操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。除空白孔外，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)溶液或待測樣品100ul，輕輕混勻，37℃，120分鐘。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。
3. 每孔加檢測溶液A工作液 100ul，37℃,60分鐘。洗板3次，350ul/每孔，甩干。
4. 每孔加檢測溶液B工作液 100ul，37℃，60分鐘，洗板5次，甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光顯色30分鐘。
6. 依序每孔加終止溶液50ul，終止反應(yīng)。用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。
注：
1．每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
2．為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層
吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將*的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
特異性
本試劑盒可同時檢測重組或天然的人MB，且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)（對數(shù)坐標(biāo)），OD值為縱坐標(biāo)（普通坐標(biāo)），在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
注意事項
1．洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
2．一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。
3．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。
4．如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
5．在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
6．底物請避光保存。
檢測范圍：
0.3 ng/mL -500 ng/mL
說明
1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
2. 小心吸取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時，*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育”時間，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。而且，洗滌不充分將影響試驗結(jié)果。
3. 試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃，部分試劑保存于2-8℃，具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。
4. 濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
5. 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
6. 中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準(zhǔn)。
7. 所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8. 有效期：6個月

廈門慧嘉生物*經(jīng)營ELISA試劑盒及Santa/Abcam抗體、Prospec細(xì)胞因子、Sigma/Amresco/Qiagen、Axygen耗材等生物試劑產(chǎn)品。實驗為大，誠信經(jīng)營，為客戶提供“zui高質(zhì)量的產(chǎn)品”和“的服務(wù)”。歡迎廣大老師來詢！: : 1048735792 或登陸http://www.biohj.com/（向客服人員索取說明書）

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