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ELISA試劑盒96T 人封閉抗體（BA）ELISA試劑盒

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更新時間：2018-03-22 17:49:54瀏覽次數(shù)：380次

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廈門慧嘉生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡介

廈門慧嘉生物*經(jīng)營人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒。誠信經(jīng)營，價格實(shí)惠，服務(wù)周到，質(zhì)量有保證。歡迎廣告老師來詢！: :

詳細(xì)介紹

廈門慧嘉生物*經(jīng)營ELISA試劑盒及Santa/Abcam抗體、Prospec細(xì)胞因子、Sigma/Amresco/Qiagen、Axygen耗材等生物試劑產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)為大，誠信經(jīng)營，為客戶提供“zui高質(zhì)量的產(chǎn)品”和“的服務(wù)”。歡迎廣大老師來詢！: : 1048735792 或登陸http://www.biohj.com/（向客服人員索取原版說明書）

產(chǎn)品名稱：人封閉抗體（BA）ELISA Kit
產(chǎn)品英文： Human Blocking antibody,BA ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格： 96T
產(chǎn)品類別：人自身免疫類ELISA試劑盒[Human autoimmunity ELISA Kit]

人封閉抗體（BA）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用

特異性：本試劑盒可檢測人封閉抗體（BA），且與其他相關(guān)抗體無交叉反應(yīng)。
有效期：6個月
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中封閉抗體（BA）含量。
說明
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3．中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準(zhǔn)。
4．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 酶結(jié)合物（Conjugate）：2×6 ml/瓶。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：2×6 ml/瓶。
4. 陽性對照（Positive Control）：1×0.5ml/瓶。
5. 陰性對照（Negative Control）：1×0.5ml/瓶。
6. 底物溶液A（Substrate A）：1×7 ml/瓶。
7. 底物溶液B（Substrate B）：1×7 ml/瓶。
8. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×15ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋20倍。
9. 終止液（Stop Solution）：1×7ml/瓶。

需要而未提供的試劑和器材
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等
標(biāo)本的采集及保存
1. 血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或室溫過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔，不加任何溶液；設(shè)陰性對照孔2孔，加陰性對照100μl；設(shè)陽性對照孔2孔，加陽性對照100μl；余孔加100μl*，然后直接加待測樣本5μl。注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃放置30分鐘。
2. 棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
3. 每孔加酶結(jié)合物100μl（空白孔除外），充分混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃放置20分鐘。
4. 棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
5. 依序每孔加底物溶液A和B各50μl，37℃避光顯色10分鐘。
6. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
7. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
注：
1. 用戶在初次使用試劑盒時，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請于2-8℃保存。
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板：如果有自動洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
計(jì)算
1. 目測法：比臨界對照顯色深的樣本為陽性，比臨界對照顯色相同或顯色淺的為陰性。
2. 酶標(biāo)儀測定：判斷值（OD值）=陰性對照平均OD值×2.1，樣品OD值大于判斷值為陽性，小于等于為陰性。陰性對照平均OD值小于0.05時，按0.05計(jì)算。
注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計(jì)算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
5. 在配制檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
6. 底物請避光保存。
7. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。