按1．4節(jié)方法處置樣品后按上述色譜條件進(jìn)行測定。得到樣品色譜圖如圖所示。甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷的殘留量分別為1.752.131.83mg/kg白菜中加入上述3種農(nóng)藥作為模擬蔬菜樣品。
主要應(yīng)用于糧食、蔬菜和水果上。雖然有機(jī)磷農(nóng)藥屬非耐久性農(nóng)藥， 有機(jī)磷農(nóng)藥是目前我國使用量較大的殺蟲劑之一。但其大量使用肯定會對環(huán)境發(fā)生負(fù)面影響，對人、蓄構(gòu)成嚴(yán)重威脅．臨時食用受污染的糧食、蔬菜，導(dǎo)致癌癥、動脈硬化、心血管病、胎兒畸形、死胎、早天、早衰等疾病的重要原因；絕大多數(shù)人食用有害蔬菜后并不馬上表示出癥狀，但毒物在人體中富集，時間長了便會釀成嚴(yán)重后果。國近年來發(fā)生的農(nóng)藥中毒事故大多數(shù)集中于高毒有機(jī)磷農(nóng)藥，以對硫磷zui多，局部地區(qū)占80％左右。因此，建立有效的檢測農(nóng)副產(chǎn)品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的方法具有重要意義。有機(jī)磷農(nóng)藥的測定常采用氣相色譜法，可是大部分有機(jī)磷農(nóng)藥具有很強(qiáng)的極性和熱不穩(wěn)定性，給氣相色譜分析帶來一定的難度。本研究采用液相色譜法同時測定蔬菜中甲基對硫磷、乙基對硫磷和甲拌磷。
1實驗局部
1．1儀器與試劑
LC-1OA 高壓溶液輸送泵和N2000色譜工作站（浙江大學(xué)智能信息工程研究所）BF2000氮氣吹干儀（北京八方世紀(jì)科技有限公司）FS-1電動勻漿機(jī)（金壇市富華儀器有限公司）．試劑．甲基對硫磷標(biāo)準(zhǔn)品（99.0％，儀器．LC-1OAT液相色譜儀（日本島津公司）包括：SPD-10AVP10APVP紫外-可見檢測器。國家農(nóng)藥質(zhì)檢中心（沈陽）乙基對硫磷標(biāo)準(zhǔn)品（99.0％，天津農(nóng)藥質(zhì)檢中心）甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)品（98.0％，天津農(nóng)藥質(zhì)檢中心）甲醇（色譜純，北京化工廠）乙腈（色譜純，天津市博迪化工有限公司）實驗用水為重蒸餾水。
1．2色譜條件
液相色譜柱為Shim-PackVP-ODS150L4．6流動相為V甲醇：V水=8515流速為1.0mLmin．進(jìn)樣量20uL以峰面積外標(biāo)法定量。
1．3規(guī)范溶液的配制
用甲醇制成一定濃度的貯藏液，準(zhǔn)確稱取一定量的農(nóng)藥規(guī)范品。再逐級稀釋貯藏液，得質(zhì)量濃度分別為0.100.501.01.52.0mgL規(guī)范混合液。
1．4樣品處置方法
取可食部分，取1000g白菜。用干凈的紗布擦去樣品表面的附著物，采用對角線分割法，取對角部分，將其切碎．準(zhǔn)確稱取3份25g試樣，分別加入50.0mL乙腈，勻漿機(jī)中勻漿2min后用濾紙過濾，濾液收集到裝有5g氯化鈉的100mL具塞量筒中，蓋上塞子，劇烈震蕩1min靜至10min使乙腈與水相分層．將含乙腈的有機(jī)層經(jīng)盛有3g*的漏斗過濾于100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，從中吸取10mL溶液，再用氮吹儀吹至近干后用甲醇溶解定容至5mL經(jīng)0.45&mum濾膜過濾后進(jìn)樣。
2結(jié)果與討論
2．1測定波長的選擇
測得3種農(nóng)藥的zui大吸收波長分別為甲基對硫磷265nm乙基對硫磷259nm甲拌磷為238nm．綜合考慮3種組分的zui大吸收值及靈敏度，分別將3種農(nóng)藥的規(guī)范貯藏液依次用UV一1100紫外／可見分光光度計進(jìn)行波長掃描。zui終選擇紫外檢測波長為250nm
2．2流動相組成對分離度的影響
隨著甲醇含量的增加，實驗考察了甲醇-水的不同比例對甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷分離的影響。實驗結(jié)果標(biāo)明。其分離度逐漸減小，當(dāng)甲醇：水=8515時，各組分仍能夠得到很好的分離，且分析所用的時間較短。
2．3工作曲線和檢出限
優(yōu)化的色譜條件下進(jìn)行分析，取1．3節(jié)的規(guī)范溶液。得到規(guī)范色譜圖。同一樣品平行測定5次，取其平均值，繪制工作曲線，以峰面積A對濃度cmgL回歸計算，結(jié)果標(biāo)明線性關(guān)系良好，回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢測限。
2．4精密度實驗
上述色譜條件下，取質(zhì)量濃度為1.5mgL混合規(guī)范品。連續(xù)進(jìn)行7次測定，經(jīng)計算得到測定甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷的精密度RSD分別為4.6％、3.2％、2.9％。
2．5回收率測定
按&ldquo1．4&rdquo節(jié)方法制備樣品液進(jìn)行測定，已知含量的白菜樣品中分別加入不同濃度的有機(jī)磷農(nóng)藥規(guī)范品。扣除樣品中原有的農(nóng)藥含量，求出加標(biāo)回收率，結(jié)果可知，甲基對硫磷回收率為95.44％～98.33％；乙基對硫磷回收率為93.33％～101.67％；甲拌磷回收率為94.00％～97.78％。
2．6樣品分析
