（北京市理化分析測(cè)試中心，國(guó)產(chǎn)科學(xué)儀器應(yīng)用示范中心，北京 100089）
摘要：本文通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)不同麝香樣品乙醇提取物進(jìn)行初步定性分析，以判斷不同麝香樣品的品質(zhì)。結(jié)果表明，天然麝香樣品中除含有效成份麝香酮外，還含有多種甾類(lèi)化合物。而幾種市售麝香樣品中有些僅麝香酮含量較為顯著，幾乎不含甾類(lèi)化合物；其它物質(zhì)為脂肪酸（酯）。實(shí)驗(yàn)表明，通過(guò)乙醇提取-氣相色譜/質(zhì)譜法可簡(jiǎn)單、快速、有效鑒定不同麝香的品質(zhì)。
關(guān)鍵詞：麝香，麝香酮，氣相色譜儀，質(zhì)譜
Preliminary Identification of Musks for Different Quality by GasChromatography-Mass Spectrometry
Wang Yu, Liu Cong, Chen Shun-cong, Wu Yan-wen
（Beijing Center for Physical & Chemical Analysis,Application & Demonstration Center for Homegrown ScientificInstruments, Beijing 00089, China）
Abstract:
A study for the preliminary identification of different qualitymusks by gas chromatography-mass spectrometry （GC/MS） is presented.The musk samples were extracted using ethanol, and then the muskextracts carried out qualitative analysis by GC/MS. The resultsshowed: as active ingredient, the muscone couldn’t be the onlybasis to identify the natural musk; there were various steroids innatural musk besides muscone; In the some musk samples withoutsteroids, the higher fatty acid/ ester was detected. Using GC/MSwas an easy, effective and rapid method for identification ofdifferent quality musks.
Keywords: Musk, Muscone, Gas Chromatography-Mass Spectrometry,Ethanol Extract
麝香（Musk）為鹿科動(dòng)物麝的雄性香腺囊中的分泌物經(jīng)干燥制成，是一種傳統(tǒng)的名貴中藥材和香料。由于天然麝香市場(chǎng)價(jià)格高昂，且藥材來(lái)源極其有限，因此目前各種市售麝香商品中既有人工合成麝香，也有各種摻假偽劣“麝香”。通常鑒定麝香的方法主要有物理性狀的判斷（如顯微鑒定等）和測(cè)定主要活性成分麝香酮（Muscone）的含量的方法[1,2]。這些方法都存在一定的片面性，如顯微鑒定方式不能有效判斷麝香的具體成分；而麝香酮可人工合成后添加[3]。本文通過(guò)對(duì)幾種不同麝香樣品的乙醇-超聲波萃取，利用氣相色譜-質(zhì)譜法檢定不同麝香樣品中的多種組分，并據(jù)此對(duì)不同麝香的品質(zhì)進(jìn)行初步鑒定。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 儀器及工作條件
GC/MS300氣相色譜/質(zhì)譜儀（北京東西分析儀器有限公司）；GDYQ-721S超聲波輔助快速提取儀（長(zhǎng)春吉大·小天鵝儀器有限公司）。SE30毛細(xì)管柱
GC/MS儀器條件：氣相色譜部分進(jìn)樣口溫度250℃；柱箱溫度：初始溫度60℃，保持10min，以5℃/min速率升溫至160℃，保持5min，以10℃/min速率升溫至290℃，保持10min；不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1μL，1min后開(kāi)分流閥；色譜柱為DB-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）；載氣為高純氦氣。
質(zhì)譜部分 電子轟擊離子源（EI），能量70eV；接口溫度250℃；離子源溫度150℃；四極桿質(zhì)量分析器；溶劑延遲2min，數(shù)據(jù)采集時(shí)間58 min；掃描質(zhì)量范圍30-500amu。
1.2 主要試劑
無(wú)水乙醇（分析純，北京化工廠）；*（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；天然麝香（全軍中藥研究所提供）。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
準(zhǔn)確稱(chēng)取50mg麝香樣品（至0.0001g），置于具塞刻度試管中。試管中加入4.0mL無(wú)水乙醇和1g*，加蓋浸泡過(guò)夜后用超聲波萃取30min（萃取溫度25℃，功率400W）。待萃取液靜置澄清，吸取上層清液經(jīng)0.45μm有機(jī)微孔濾膜過(guò)濾后，在上述的儀器條件下用GC/MS進(jìn)行測(cè)定。
2 結(jié)果與討論
2.1 麝香酮的判定
麝香中主要的活性物質(zhì)為麝香酮（3-甲基環(huán)十五烷酮，3-methyl-Cyclopentadecanone），麝香酮目前可由人工合成，這也是解決天然麝香來(lái)源匱乏的主要途徑之一。如果只通過(guò)麝香酮的含量判斷麝香的品質(zhì)，雖然簡(jiǎn)單但顯然是不全面的。因?yàn)樘烊击晗闶趋甑姆置谖?，不僅僅含有麝香酮，還含有復(fù)雜的生物組分。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也說(shuō)明了這一點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)的三類(lèi)樣品中，天然麝香和*中都含有麝香酮，麝香酮的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖如圖1所示。
圖1 樣品中麝香酮與數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖的比較
Fig.1 Compared the mass spectrum of muscone in samples （red）with standard reference’s （blue）
2.2 天然麝香樣品中多組分的判定
實(shí)驗(yàn)獲得天然麝香樣品乙醇提取物的總離子流圖（見(jiàn)圖2），并利用NIST數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)每種組分的質(zhì)譜圖進(jìn)行結(jié)構(gòu)檢索、匹配。
圖2 天然麝香樣品的質(zhì)譜總離子流圖（TIC）
Fig.2 The total ion chromatogram （TIC） of muscone by full scanin natural musk
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，天然麝香中除了主要成份麝香酮（保留時(shí)間為36.61min）含量較為顯著外，還含有多種的甾類(lèi)化合物等其他物質(zhì)，這與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)相一致[4-6]。將實(shí)驗(yàn)獲得的質(zhì)譜圖與NIST數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行匹配，大致可以確定十多種甾類(lèi)化合物，如去氧異雄甾酮-3-乙酸酯、3-羥基-雄甾-17-酮、表雄（甾）酮、雄甾-3,17-二醇、*等；還有其它的物質(zhì)，如環(huán)十五烷酮等。圖3-7比較部分目標(biāo)物質(zhì)譜圖與NIST數(shù)據(jù)庫(kù)中的標(biāo)準(zhǔn)譜圖。
圖3 樣品中去氧異雄甾酮-3-乙酸酯與數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖的比較
Fig.3 Compared the mass spectrum of prasterone acetate insamples （red） with standard reference’s （blue）
圖4 樣品中3-羥基-雄甾-17-酮與數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖的比較
Fig.4 Compared the mass spectrum of 3-hydroxy-androstan-17-onein samples （red） with standard reference’s （blue）
圖5 樣品中表雄（甾）酮與數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖的比較
Fig.5 Compared the mass spectrum of epiandrosterone in samples（red） with standard reference’s （blue）
圖6 樣品中雄甾-3,17-二醇與數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖的比較
Fig.6 Compared the mass spectrum of androstane-3,17-diol insamples （red） with standard reference’s （blue）
圖7 樣品中環(huán)十五烷酮與數(shù)據(jù)庫(kù)中質(zhì)譜圖的比較
Fig.7 Compared the mass spectrum of Cyclopentadecanone insamples （red） with standard reference’s （blue）
2.3 市售麝香樣品中組分的判定
實(shí)驗(yàn)對(duì)3種市售麝香樣品中多組分進(jìn)行的測(cè)定，結(jié)果表明，市售麝香中有些僅僅含有麝香酮；而有些不含麝香酮。實(shí)驗(yàn)的2種市售麝香樣品中的幾乎不含甾類(lèi)化合物，經(jīng)獲得的質(zhì)譜圖與NIST數(shù)據(jù)庫(kù)匹配確定樣品中含飽和/不飽和脂肪酸（酯）類(lèi)物質(zhì)比較顯著，如硬脂酸、*、*甲酯、棕櫚酸乙酯、油酸乙酯和*乙酯等。圖8-10比較部分目標(biāo)物質(zhì)譜圖與NIST數(shù)據(jù)庫(kù)中的標(biāo)準(zhǔn)譜圖。
圖8 樣品中*甲酯與數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖的比較
Fig.8 Compared the mass spectrum of methyl linoleate in samples（red） with standard reference’s （blue）
圖9 樣品中棕櫚酸乙酯與數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖的比較
Fig.9 Compared the mass spectrum of ethyl palmitate in samples（red） with standard reference’s （blue）
圖10 樣品中*乙酯與數(shù)據(jù)庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖的比較
Fig.10 Compared the mass spectrum of ethyl linoleate in samples（red） with standard reference’s （blue）
3.3 市售麝香樣品的測(cè)定結(jié)果
通過(guò)對(duì)天然麝香樣品和三種市售麝香樣品乙醇提取物的氣相色譜/質(zhì)譜分析，結(jié)果如表1所示。結(jié)果表明不同市售麝香品質(zhì)存在很大差異，有些樣品中僅含有效（活性）成分麝香酮；有些樣品中雖含麝香酮，但是無(wú)天然麝香中所含的甾類(lèi)物質(zhì)，僅僅含脂肪酸/酯類(lèi)化合物；而有些市售“麝香”中僅僅含有脂肪酸/酯類(lèi)物質(zhì)。從表中也可以看出，麝香酮不能作為鑒定天然麝香的*標(biāo)準(zhǔn)，甾類(lèi)物質(zhì)是一個(gè)重要的判斷依據(jù)。
表1 不同麝香樣品乙醇提取物中的主要成分
Table 1 The main components of ethanol extract in different musksamples
樣品
乙醇提取物中主要物質(zhì)
天然麝香樣品
麝香酮、甾類(lèi)化合物（*）、環(huán)十五烷酮等
市售麝香1#
麝香酮、甾類(lèi)化合物（*）
市售麝香2#
棕櫚酸乙酯、*乙酯、油酸乙酯等
市售麝香3#
麝香酮、*甲酯、硬脂酸、*等
3 結(jié)語(yǔ)
本文通過(guò)超聲波輔助萃取-氣相色譜/質(zhì)譜法定性分析不同麝香樣品的乙醇提取物中的多種組分，對(duì)不同麝香樣品的品質(zhì)進(jìn)行了初步的鑒定。結(jié)果表明該方法可快速、有效的鑒定不同品質(zhì)的麝香。由于實(shí)驗(yàn)使用天然麝香的樣品量及種類(lèi)來(lái)源所限（不能進(jìn)行不同溶劑的提取物組分比較），加之儀器靈敏度及質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)容量有限，本實(shí)驗(yàn)?zāi)壳爸荒茏鳛橐豁?xiàng)可行性研究的基礎(chǔ)工作。天然麝香組分復(fù)雜，麝香酮的含量已不能作為鑒定的*依據(jù)，而氣相色譜/質(zhì)譜法具有較強(qiáng)的分離、定性能力，適合于麝香樣品的品質(zhì)鑒定。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)，也為進(jìn)一步建立天然麝香的氣相色譜-質(zhì)譜指紋譜圖庫(kù)研究提供了必要基礎(chǔ)和可行性。
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