1998年Winston等 建立了頂空氣相色譜測定生物組織總氧自由基清除能力（total xyradical scavengingcapacity，TOSC）的方法。我們引用該方法并做了一定改進(jìn)，先后用于小鼠組織、中草藥和抗氧化劑的TOSC檢測?，F(xiàn)報(bào)道13種抗衰老保健食品的檢測結(jié)果。
1 材料與方法
I．I 儀器和試劑：氣相色譜儀（島津GC-4B），20mL硬質(zhì)頂空瓶（Agilent公司），恒溫振蕩水浴箱（上海科器公司）。2，2‘-偶氮雙（2一脒基丙烷）二鹽酸鹽（ABAP）（日本W(wǎng)akoChemical公司），4-甲硫基-2-丁酮酸鈉鹽（KMBA）（Sig-ma公司），其他試劑均為國產(chǎn)分析純。
1．2實(shí)驗(yàn)原理:在密閉頂空瓶內(nèi)熱解ABAP產(chǎn)生大量氧自由基，攻擊KMBA產(chǎn)生乙烯；抗氧化劑與KMBA競爭氧自由基能減少乙烯的產(chǎn)生，從乙烯的減少量計(jì)算所測樣品的TOSC值。
1．3 色譜條件:GDX-502玻璃填充柱（2 m ×3 mm i．d．）；進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器溫度分別為150，60和200℃；載氣（N：）、氫氣、空氣流速分別為40，50和500 mL／min；檢測器為火焰離子化檢測器（FID）。
1．4 TOSC測定:以0．1 mol／L磷酸鹽緩沖液（PBS）配制0．2 mol／LABAP、0．25 mmol／LKMBA（均為臨用時(shí)現(xiàn)配，4℃ 避光貯存），在頂空瓶中加入KMBA 0．8 mL和PBS 0．1 mL作為控制管，加入KMBA 0．8mL和樣液0．1 mL作為樣品管，分別加蓋密封后用注射器注入0．1 mLABAP，使溶液終體積為1mL。將頂空瓶放人35℃水浴振蕩反應(yīng)60 min，立即抽取頂空氣體0．6mL按“1．3”節(jié)條件進(jìn)樣。TOSC計(jì)算公式為：TOSC=100－（As/Ac ）×100（As和Ac分別為樣品管和控制管的乙烯峰面積）。
1．5樣品分析：從市場購置13種保健食品（均注有延緩衰老的作用）：口服液8種、片劑3種、膠丸劑2種。將口服液直接用PBS分步稀釋100倍（0．1mL／L）；片劑經(jīng)適當(dāng)粉碎后用PBS配制成質(zhì)量濃度為0．1mg／L的樣品溶液；膠丸劑為油劑，先用少量的乙醇溶解，再用PBS在超聲分散下分步稀釋100倍（0．1mg／L）。取上述稀釋后的13種樣品溶液各0．1 mL按“1．4”節(jié)條件處理。
2 結(jié)果與討論
10份平行樣品測定結(jié)果顯示：口服液類TOSC值以太太口服液、柔依口服羊胎精華素、*、太陽神口服液較高；片劑、膠丸類以*片較高（見圖1與表1）。
抗衰老保健食品的抗氧化活性在一定程度上可理解為其對氧自由基的清除能力。從檢測結(jié)果來看，TOSC值均大于零，并且存在較大差異，說明13種保健食品均有清除氧自由基的能力。通過TOSC的測定可以區(qū)別不同保健食品的抗氧化性能。本法通過乙烯檢測體系的轉(zhuǎn)換，使得保健食品中所有能與氧自由基起反應(yīng)的成分均被考慮，反映了被測保健食品總的抗氧化能力，比測定單一成分更為有效。
參考文獻(xiàn)：
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