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細(xì)胞: 腫瘤細(xì)胞正常細(xì)胞原代細(xì)胞

培養(yǎng)基: 微生物檢驗(yàn)系列其它生化鑒定管其它細(xì)菌檢測(cè)培養(yǎng)基抗生素檢驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)用培養(yǎng)基淋病奈瑟菌分枝桿菌結(jié)核桿菌炭疽桿菌鼠疫桿菌彎曲桿菌（包括空腸彎曲桿菌）梭狀芽胞桿菌疫苗培養(yǎng)基

生化試劑: 其它生化試劑碳水化合物類色素類其它試劑類培養(yǎng)基類酶類抗生素類緩沖劑類分離材料及耗材類4 蛋白質(zhì)類表面活性劑類氨基酸類

酶聯(lián)免疫elisa試劑盒: 酶抗體ELSA試劑盒小鼠酶聯(lián)免疫elisa試劑盒豬酶聯(lián)免疫elisa試劑盒

NF-KB檢測(cè)試劑盒

原代細(xì)胞: 原代組織提取物原代細(xì)胞提取物原代細(xì)胞培養(yǎng) 新鮮原代細(xì)胞

PCR試劑盒: 進(jìn)口PCR試劑盒

RNA/DNA提取: 蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品探針標(biāo)記及檢測(cè)產(chǎn)品核酸電泳及回收

血清: 雞血清

ATCC細(xì)胞: 小鼠源細(xì)胞人正常組織來(lái)源細(xì)胞

質(zhì)粒

細(xì)胞系: 其它類細(xì)胞系豬細(xì)胞系猴細(xì)胞系大鼠細(xì)胞系倉(cāng)鼠細(xì)胞系小鼠細(xì)胞系人細(xì)胞系

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TSZ Elisa試劑盒在細(xì)胞免疫熒光中的應(yīng)用

時(shí)間：2017-7-19閱讀：801

I、TSZ Elisa試劑盒步驟：

一、固定：

PBS 5min×3次振蕩洗滌制作好的細(xì)胞爬片。

固定液覆蓋細(xì)胞，RT 靜置5min。

PBS 5min×3次振蕩洗滌。

二、通透化：

通透液覆蓋細(xì)胞，RT 靜置30min。

PBS 5min×3次振蕩洗滌。

三、封閉：

封閉液覆蓋標(biāo)本表面37℃孵育h。

四、一抗孵育：

一抗以合適濃度稀釋PBS，覆蓋標(biāo)本表面。

4℃孵育過(guò)夜，第二天37℃復(fù)溫h。

PBS 5min×3次振蕩洗滌。

五、TSZ Elisa試劑盒二抗孵育：

fitC標(biāo)記二抗以合適濃度稀釋于PBS，覆蓋標(biāo)本表面。

37℃避光孵育<60min。

PBS 5min×3次避光振蕩洗滌。

六、染核：

新鮮稀釋Hoechst覆蓋細(xì)胞表面，RT避光靜置<0min。

PBS 5min×3次避光振蕩洗滌。

七、封片：

在干凈的載玻片上滴一滴封片劑，將爬片的細(xì)胞面扣在封片劑上。

八、鏡檢，4℃避光保存。

II、注：

、細(xì)胞密度要合適，狀態(tài)較好。

2、從孵育二抗開(kāi)始要避光(關(guān)閉室內(nèi)日光燈即可)。

3、完成后及時(shí)鏡檢，照相;分別用不同波長(zhǎng)激發(fā)熒光，在Photoshop軟件下合成一張圖。

III、試劑配制：

、固定液：4%多聚甲醛/PBS：

4g多聚甲醛，50～80mlPBS，加熱至60℃，持續(xù)攪拌至*溶解，(通常需滴加少許n NaOH才能使溶液清亮)，定容00ml，RT保存。

2、通透液：0.5 %(v/v)TritonX-00/PBS

3、封閉液：正常山羊血清稀釋于PBS;或商品化封閉液成品。

4、Hoechst：Hoechst33258即可。

5、TSZ Elisa試劑盒封片劑：50%(v/v)甘油/PBS。

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TSZ Elisa試劑盒在細(xì)胞免疫熒光中的應(yīng)用

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