犬腎上腺素（EPI）Elisa試劑盒操作步驟
.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。 
80 ng/L  5 號標(biāo)準(zhǔn)品 50µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
40 ng/L  4 號標(biāo)準(zhǔn)品 50µl的5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
20 ng/L  3 號標(biāo)準(zhǔn)品 50µl的4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
0 ng/L  2 號標(biāo)準(zhǔn)品 50µl的3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
5 ng/L   號標(biāo)準(zhǔn)品 50µl的2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 50µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
 
2.  加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl， 
然后再加待測樣品 0µl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 
3.  溫育：用封板膜封板后置37℃溫育 30 分鐘。    
4.  配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用 
5.  洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5次，拍干。 
6.  加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50µl，空白孔除外。  
7.  溫育：操作同 3。 
8.  洗滌：操作同 5。 
9.  顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
0 分鐘. 
0.  終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。 
.  測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止
液后 5 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。