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大鼠乳腺癌細(xì)胞;CHGF-003操作步驟

時(shí)間:2021/7/13閱讀:795
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大鼠乳腺癌細(xì)胞;CHGF-003操作步驟:
)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量,使的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃6~8小時(shí)(或隔夜)→液氮槽儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。

人腎足突細(xì)胞*培養(yǎng)基
人心房肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
人心室肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
人心肌成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基
人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)基

 

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