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小鼠循環(huán)免疫復合物(CIC)檢測試劑盒操作步驟

時間:2017/3/21閱讀:839
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、Hcy Elisa試劑盒包被過程(注意設置空白對照,陰性對照):

小鼠循環(huán)免疫復合物(CIC)檢測試劑盒將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入00μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?

2、封閉酶標反應孔:

5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.

Hcy Elisa試劑盒洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干洗滌次數(shù)3次

3、加入待檢測樣品(建立合適的濃度梯度):

小鼠循環(huán)免疫復合物(CIC)檢測試劑盒檢測時一般采用:50-:400的稀釋度,應采用較大稀釋體積進行,一般保證樣品吸取量>20μl.

將稀釋好的樣品加入酶標反應孔中,每樣品至少加雙孔,每孔00μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.

4、加入酶標抗體:

酶標抗體:根據(jù)酶結(jié)合物提供商提供的參考工作稀釋度進行.37℃,30-60min之間.短于30min往往結(jié)果不穩(wěn)定.每孔加00μl.洗滌同前.

5、加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):

TMB-過氧化氫尿素溶液,OPD-過氧化氫底物液系統(tǒng)次之.

底物加入量:每孔00μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.

6、終止反應:

每孔加入終止液50μl終止反應,于20min內(nèi)測定實驗結(jié)果.

7、結(jié)果判斷:

OPD顯色后采用492nm波長,TMB反應產(chǎn)物檢測需要450nm波長.檢測時一定要首先進行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測定標本孔的吸收值與一組陰性標本測定孔平均值的比值(P/N)表示,當P/N大于2時作為抗體的效價.(數(shù)值的大小依具體檢測要求而定.)

小鼠循環(huán)免疫復合物(CIC)檢測試劑盒經(jīng)過嚴格交叉反應和干擾測試及穩(wěn)定性試驗;明確的敏感度;針對所有樣品類型達到的性能;廣泛的檢測范圍可以滿足大多數(shù)檢測要求;完善的售后服務和免費的免去您的后顧之憂,凡購買試劑盒者都可享受我公司相應折扣優(yōu)惠,如有需要,可購買Hcy Elisa試劑盒!

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