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真菌細(xì)胞凋亡的檢測方法

時間：2016/8/8閱讀：1528

細(xì)胞凋亡現(xiàn)象的標(biāo)記主要表現(xiàn)在以下兩個方面——形態(tài)學(xué)變化的特征和細(xì)胞內(nèi)生化和細(xì)胞學(xué)的應(yīng)答反應(yīng)。

①細(xì)胞凋亡現(xiàn)象以一系列*的形態(tài)學(xué)變化定義。

*步明顯的變化是細(xì)胞收縮及核染色質(zhì)凝集。然后，伴隨著核的裂解形成大量核膜包被的泡狀的凋亡體，隨后凋亡體被吞噬泡(phagophore)吞噬形成自噬體囊泡。自噬體囊泡外膜與液泡膜融合，自噬體囊泡的內(nèi)容物以單層膜結(jié)構(gòu)的吞噬小體形式進(jìn)入液泡的內(nèi)腔。

隨后，吞噬小體及其內(nèi)容物被液泡內(nèi)的水解酶降解。整個過程終止于凋亡體在內(nèi)的分解及細(xì)胞組分的再循環(huán)。

值得注意的是，盡管細(xì)胞凋亡和壞死的機(jī)制及形態(tài)特征不同，但它們之間存在很多相似處，通常情況下很難以常規(guī)的顯微鏡檢將兩者區(qū)分開來。

②細(xì)胞凋亡的鑒定不能僅依賴于細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征，還需額外的凋亡特異性標(biāo)記物的存在。

凋亡細(xì)胞主要的生化及細(xì)胞學(xué)應(yīng)答反應(yīng)包括活性氧簇(reactive oxygen specv，ROS)的大量積聚，半胱天冬酶(caspase)的活化，DNA被特殊的內(nèi)切酶裂解及細(xì)胞脂質(zhì)層中向內(nèi)構(gòu)象的磷脂酰發(fā)生外翻。

這些變化可被一系列直接或間接的方法檢測。但是，必須綜合考慮相關(guān)優(yōu)勢和劣勢來選擇不同的檢測方法。并不是所有的方式都適用于所有的狀況。