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當前位置:上海一研生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-熒光探針法>> 腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法
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所 在 地上海市
更新時間:2019-03-07 14:08:03瀏覽次數(shù):3059次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法中含有聚合酶鏈式反應所需要各種試劑組分,如:引物、dNTPs、緩沖液、Taq酶等,PCR反應液混合液中加入檢測樣品,即可進行PCR擴增反應。PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷,陽性樣本將在相應大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。
產(chǎn)品名稱:腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法
編號:EY00P1420
分類:PCR-熒光探針法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
熒光PCR如何實現(xiàn)實時監(jiān)控的呢?
Ø 腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法PCR反應體系中加入熒光染料
Ø 所有的定量PCR儀器都有三個共同的組成部分(檢測器、激發(fā)光源、熱循環(huán)模塊)
Ø 在擴增過程中,熒光信號隨著PCR產(chǎn)物的增加而增強
Ø 每個循環(huán)結束后,定量PCR儀器通過光學系統(tǒng)記錄熒光信號的增加
Ø PCR軟件計算出數(shù)據(jù),用于實驗結果的分析
ARMS檢測方法;1個SNP位點設計雙管反應,含目的基因檢測及內(nèi)參檢測雙通道。 ?
注意事項:
1.腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法基礎程序;
2.擴增溫度和延伸溫度;
3.反應時間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應液的配制;
6.PCR技術的基本原理;
7.PCR的反應動力學;
使用方法:
腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。8.PCR擴增產(chǎn)物;
4.PCR反應體系與反應條件。
纖維素酶MES Buffer,1.0M,pH7.4 1瓶
纖維素 DE-52MES Buffer,1.0M,pH7.5 1瓶
MES Buffer,1.0M,pH8.0 1瓶
化銫MES Buffer,1.0M,pH8.5 1瓶
十六烷基三基MES Buffer,1.0M,pH9.0 1瓶
CHAPSMES Buffered Saline,5X,pH6.5 1瓶
2-( 環(huán)己基 ) 烷磺酸MES Buffered Saline,5X,pH7.0 1瓶
幾質(zhì)MES Lysis Buffer with NP-40 1瓶
化銨 TMES Lysis Buffer with NP-40,2X 1瓶
矮壯素MES Lysis Buffer with Triton 1瓶
霉素MES Lysis Buffer with Triton,2X 1瓶
4- -1- 萘酚MES SDS Running Buffer,20X1瓶
MES, Free Acid, Monohydrate1瓶
膽酸Metha瓶
化Methyl Cellulose1瓶
腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法n-Amylmercaptan規(guī)格:StandardforGC,≥99.5%(GC)
Naltrexonehydrochloride規(guī)格:>99%,BR
Nalpha-Formyl-DL-tryptophan規(guī)格:0.98
Nalpha-BOC-D-Argininehydrochloridehydrate規(guī)格:BR
Nalpha-Benzoyl-L-arginine規(guī)格:>98%,BR
NaloxoneHCldihydrate規(guī)格:>98%,二水合物,類受體拮抗劑
Nalidixicacid規(guī)格:>98%
Naftopidildihydrochloride規(guī)格:>98%,BR
Naftopidildihydrochloride規(guī)格:含量測定
NaftifineHydrochloride規(guī)格:含量測定
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