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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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GSK Elisa Kit的模式及具體的實(shí)驗(yàn)條件

時(shí)間：2018-3-5閱讀：1061
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通常在GSK Elisa Kit板孔中加入包被液后，在4-8℃冰箱中放置過(guò)夜，37℃中保溫2小時(shí)被認(rèn)為具有同等的包被效果。包被的zui適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化，每批材料需通過(guò)實(shí)驗(yàn)與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。
封閉是否必要，取決于ELISA的模式及具體的實(shí)驗(yàn)條件。并非所有的ELISA固相均需封閉，封閉不當(dāng)反而會(huì)使陰性本底增高。一般說(shuō)來(lái)，雙抗體夾心法，只要酶標(biāo)記物是高活性的，操作時(shí)洗滌*，不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。特別是用單抗腹水直接包被時(shí)，因其中大量非抗體蛋白在包被時(shí)同樣也吸附在固相表面，業(yè)已起到了類似封閉劑的作用。但在間接法測(cè)定中，封閉一般是不可少的（見(jiàn)2.2.2）。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或錫袋中，在低溫可保存數(shù)月。
封閉（blocking）是繼包被之后用高濃度的無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過(guò)程?？乖蚩贵w包被時(shí)所用的濃度較低，吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的空隙，封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，從而排斥在ELISA試劑盒其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。封閉的手續(xù)與包被相類似。zui常用的封閉劑是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白，也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封閉劑的。脫脂奶粉也是一種良好的封閉劑，GSK Elisa Kit其zui大的特點(diǎn)是價(jià)廉，可以高濃度使用（5%）。高質(zhì)量的速溶食用低脂奶粉即可直接當(dāng)作封閉劑使用，但由于奶粉的成份復(fù)雜，而且封閉后的載體不易保存，因此在試劑盒的制備中較少應(yīng)用。
151006-14-3         普伐他汀1，1，3，3－四甲基氨基丁烷標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
1508-76-5     Procyclidine Hydrochloride    鹽酸丙環(huán)定標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
1508-75-4     Tropicamide    標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
1508-65-2     Oxybutynin Chloride     氯化奧昔布寧標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
150399-21-6    Balsalazide Disodium    標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
150-13-0    Aminobenzoic Acid    氨苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
149845-06-7     Saquinavir Mesylate     甲磺酸沙奎拉韋標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
149-32-6    Erythritol    赤蘚糖醇標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
148408-66-6    Docetaxel    三水多烯標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
GSK Elisa Kit

 

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