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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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操作因素對(duì)抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的影響

時(shí)間：2017-9-20閱讀：970
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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒測(cè)定步驟：固相包被→加待測(cè)樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。

ELISA試劑盒操作較繁雜,在操作中應(yīng)注意以下5個(gè)方面。

1. 隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響，某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng)，因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理。間接法測(cè)定中，標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。

2. 加樣一般使用加液器，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。

3. 在成批手工檢測(cè)中，還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不一致，對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法及定量檢測(cè)影響很大，不注意可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。

4. 洗滌是ELISA試劑盒操作過(guò)程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物，終止抗原抗體反應(yīng)，除去標(biāo)本中與反應(yīng)無(wú)關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過(guò)程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)?？捎孟窗鍣C(jī)洗板或手工洗板，前者洗滌質(zhì)量較好，各反應(yīng)孔洗滌效果均一，批內(nèi)、批間差異小，手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果，差異不宜太大。

5. 準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒測(cè)讀儀，比色法判讀可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)，根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長(zhǎng)的濾光片，以空白孔校零測(cè)定反應(yīng)孔的吸光度值。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。
25-羥基-原人參二醇    25-OH-Protopanaxdiol    ≥97%    純度：
25-羥基-原人參三醇        25-OH-Protopanaxtiol    ≥97%    純度：
25-羥基-原人參三醇    25-OH-Protopanaxtiol    ≥97%    純度：
2-羥基澤蘭內(nèi)酯    2-Hydroxyeupatolide    ≥97%            純度：
2-O-沒(méi)食子?；鸾z桃苷            2-O-galloylhyperin    ≥98%            純度：
丁香醛    3,5-Dimethoxy-4-hydroxybenzaldehyde    ≥97%    純度：
3,6’－二芥子?；崽?nbsp;   3,6’－Disinapoyl sucrose    ≥95%    純度：
3’-甲氧基    3’- Methoxy Puerarin    ≥99%    純度：
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒

 

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