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上海一研生物科技有限公司

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elisa試劑盒: Hcy Elisa 試劑盒 IL-22 Elisa Kit S-100B Elisa Kit VE Elisa Kit IgG elisa Kit 超氧化物歧化酶elisa 試劑盒 NF-KB ELISA定量試劑盒 IRF1 ELISA定量試劑盒 GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒 SOD 酶聯(lián)免疫分析試劑盒 GPX 酶聯(lián)免疫分析試劑盒 GSG 酶聯(lián)免疫分析試劑盒 GT-17檢測(cè)ELISA試劑盒 E2檢測(cè)ELISA試劑盒庚肝抗體IgM檢測(cè)試劑盒 GS elisa 試劑盒 T Elisa Kit PⅢNP Elisa Kit NRG3 Elisa Kit ENA-78/CXCL5 Elisa Kit Wnt-3a蛋白Elisa試劑盒抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒白介素20Elisa試劑盒蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)性蛋白激酶2δElisa試劑盒肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa試劑盒胎盤(pán)泌乳素Elisa試劑盒多巴胺Elisa試劑盒鴨elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 羊elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 魚(yú)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 植物elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 貂elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 鵝elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 鴿子elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 狗elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 鮭魚(yú)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 甲型流感elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 鯨elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 鹿elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 驢elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 裸鼠elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 駱駝elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 倉(cāng)鼠elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 大鼠elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 猴elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 雞elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 馬elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 貓elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 綿羊elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 牛elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 犬elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 人elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 山羊elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 兔ELSIA試劑盒豚鼠elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 小鼠elisa試劑盒豬elisa試劑盒丁肝抗體IgM檢測(cè)試劑盒其它elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)

生化試劑: 乙基異丙基丙烯酰胺水楊酸碘代硫代乙酰六氟異丙醇溴癸烷溴乙酸四丙基聚乙烯硫酸鉀其它生化試劑其它化學(xué)試劑植物激素及核酸類(lèi) 維生素類(lèi) 碳水化合物類(lèi) 色素類(lèi) 培養(yǎng)基類(lèi) 酶類(lèi) 抗生素類(lèi) 緩沖劑類(lèi) 分離材料及耗材類(lèi) 蛋白質(zhì)類(lèi) 表面活性劑類(lèi) 氨基酸類(lèi)

細(xì)胞: 實(shí)驗(yàn)耗材原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒原代

培養(yǎng)基: 吡硫鎓鈉微生物檢驗(yàn)系列其它生化鑒定管其它細(xì)菌檢測(cè)培養(yǎng)基抗生素檢驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)用培養(yǎng)基淋病奈瑟菌分枝桿菌炭疽桿菌鼠疫桿菌乳酸菌、雙歧桿菌彎曲桿菌（包括空腸彎曲桿菌）梭狀芽胞桿菌疫苗培養(yǎng)基

進(jìn)口elisa試劑盒: 豬elisa試劑盒小鼠elisa試劑盒兔elisa試劑盒人elisa試劑盒犬elisa試劑盒牛elisa試劑盒大鼠elisa試劑盒

ATCC細(xì)胞: 其它源細(xì)胞大鼠源細(xì)胞小鼠源細(xì)胞腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞

PCR試劑盒: PCR-熒光探針?lè)?/a> PCR檢測(cè)試劑盒

血清: A/B/O型紅細(xì)胞血清火雞紅細(xì)胞血清鯉魚(yú)血清鴿子血清烏雞血清大小鼠血清鵝血清豚鼠血清綿羊血清雞血清

質(zhì)粒

LAMP試劑盒: LAMP檢測(cè)試劑盒

科研細(xì)胞: 細(xì)胞系

ELISA檢測(cè)試劑盒: 其它類(lèi)ELISA檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞分析: 細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑細(xì)胞遷移/侵襲細(xì)胞周期細(xì)胞衰老報(bào)告基因檢測(cè) 細(xì)胞因子及蛋白 /細(xì)胞因子細(xì)胞器提取和染色細(xì)胞凋亡細(xì)胞增殖/毒性

原代細(xì)胞: 其它原代細(xì)胞豬原代細(xì)胞兔原代細(xì)胞雞原代細(xì)胞大鼠原代細(xì)胞小鼠原代細(xì)胞人原代細(xì)胞

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小鼠肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基操作步驟

時(shí)間：2025/5/15閱讀：16

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小鼠肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基操作步驟

** 細(xì)胞傳代與凍存**

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)即可進(jìn)行傳代。棄去舊培養(yǎng)基，用預(yù)熱的PBS輕柔洗滌兩次，加入0.25%（含EDTA）消化1-2分鐘。鏡下觀察細(xì)胞變圓后，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，輕柔吹打形成單細(xì)胞懸液。離心（1000rpm, 5分鐘）后棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按1:2至1:3比例分瓶培養(yǎng)。

**質(zhì)量控制要點(diǎn)**

* **形態(tài)觀察：** 永生化肝星狀細(xì)胞應(yīng)呈現(xiàn)長(zhǎng)梭形或多角形，胞質(zhì)豐富，核仁明顯。若出現(xiàn)細(xì)胞變圓、脫落或大量空泡，提示培養(yǎng)條件異常。

* **生長(zhǎng)曲線：** 定期繪制生長(zhǎng)曲線，監(jiān)測(cè)細(xì)胞增殖速率。異常增殖或停滯可能表明培養(yǎng)基失效或細(xì)胞污染。

* **功能驗(yàn)證：** 建議定期通過(guò)α-SMA免疫熒光染色或膠原分泌檢測(cè)驗(yàn)證細(xì)胞活化狀態(tài)，確保其保持星狀細(xì)胞特性。

**7. 注意事項(xiàng)**

* **無(wú)菌操作：** 所有操作需在超凈臺(tái)中進(jìn)行，避免污染。

* **培養(yǎng)基保存：** 培養(yǎng)基4℃保存不超過(guò)2周，避免反復(fù)凍融。

* **細(xì)胞狀態(tài)：** 永生化細(xì)胞雖可長(zhǎng)期培養(yǎng)，但建議定期更換新鮮凍存細(xì)胞，避免遺傳漂變。

* **實(shí)驗(yàn)記錄：** 詳細(xì)記錄培養(yǎng)基批次、細(xì)胞代數(shù)和實(shí)驗(yàn)條件，確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。

**8. 常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案**

* **細(xì)胞貼壁不良：** 檢查培養(yǎng)瓶是否經(jīng)過(guò)包被，或增加血清濃度至15%。

* **增殖緩慢：** 確認(rèn)培養(yǎng)基新鮮度，或嘗試添加2mM L。

* **污染處理：** 立即丟棄污染細(xì)胞，消毒培養(yǎng)環(huán)境，啟用新批次培養(yǎng)基。

（注：具體操作參數(shù)可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件和細(xì)胞株特性進(jìn)行優(yōu)化。）

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