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大腸癌肝轉移細胞;CJF

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質代理商

所  在  地上海市

更新時間:2021-04-07 20:11:02瀏覽次數(shù):708次

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公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

大腸癌肝轉移細胞;CJF

貼壁生長

EY-X63970

細胞名稱  大腸癌肝轉移細胞;CJF
形態(tài)特性: 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

傳代情況: C2

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
UDP-葡萄糖-3-O-類黃糖苷轉移酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSFlavonoids glycosyl transferase

半胱氨合成酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSaminothiopropionic acid synase

4-香豆連接酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)3%FBS4-coumarate coenzyme A ligase

細胞分裂素氧化酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS;0.01mg/mlInsulincytokinin oxidase

UDP-葡萄糖糖蛋白糖基轉移酶1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSUDP-Glucose Glycoprotein Glucosyltransferase 1

酪胺羥肉桂基轉移酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)5%FBStyramine hydroxycinnamoyl transferase

甲單加氧酶檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;8ng/mlrHuGM-csf;10%CO2Methane monooxygenase

甲基輔酶M還原酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;10mMHepes+1mM丙銅鈉MCR

葡聚糖水合二激酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長;部分細胞貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;4mMglutamineglucan-water dikinase

6-脫氧長春花甾檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS6-deoxoCS

外切葡聚糖酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁/懸浮生長培養(yǎng)條件: Grace'sInsectMedium(GIMw/oBSA,FCS,WholeEggUltrafiltrate)10%FBSexoglucanase

蛋白質二硫鍵異構酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長培養(yǎng)條件: F12K10%FBSprotein disulfide isomerase

類鈣調磷酶B蛋白檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;4mMglutamine;6-8ng/mlGM-CSFCalcineurin B-Like

纖維素合成酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium10%FBScellulose synthase

可溶性果膠檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSsoluble pectin

KORRIGAN酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長,有1%~2%的細胞可輕微貼壁。培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;5-7u/mlEpo

端粒酶逆轉錄酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBStelomerase reverse transcriptase
大腸癌肝轉移細胞;CJF五味子丙素61301-33-5英文名:Schisandrin C  

英文別名:Schizandrin C; Wuweizisu C  

CAS登錄號:61301-33-5

分子式:C22H24O6

分子量:384.42

分子結構:

外觀:無色片狀晶體

規(guī)格:20mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等

提取來源:木蘭科植物五味子[Schisandra chinensis (Turcz.)Baill.]的種子、莖等植物

溶解性:溶于、、等。

熔點:122~123℃

旋光度:-54.9°(c1.0,),-31.4°(c0.587,)

藥理藥效:有抗病、抗癌、消炎等活性。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

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