在大鼠Elisa試劑盒操作過(guò)程中總是會(huì)呈現(xiàn)或大或小的問(wèn)題，比如說(shuō)花板、假陽(yáng)性、全顯色、信號(hào)值比空白還低等等。今日上海一研為咱們帶來(lái)了一些實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，教您這樣操作ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)不會(huì)失利。
1.有的包被原可能不是蛋白，關(guān)于和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)咱們要事前對(duì)其改造再加以包被，我把辦法簡(jiǎn)明的列出如下：
2.親和素：先親和素先包被載體，參加化的DNA，這種包被辦法均勻、結(jié)實(shí)，已擴(kuò)展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。
3.小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才干固定在固相載體上。包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這到你做出的抗體可不能夠 被其辨認(rèn)，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時(shí)，師兄都嚴(yán)格正告我必定要在冰浴下緩慢消融就是這個(gè)道理。
4.脂類物質(zhì)：可將其在有機(jī)溶劑中溶解后參加Elisa板孔中，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或涼風(fēng)吹干，待酒精蒸發(fā)后，讓脂質(zhì)天然干固在固相外表。
5.在洗板時(shí)會(huì)有必定誤差，人為因素很大(當(dāng)然有條件的用洗板機(jī)在外)，洗的不*或串了孔，對(duì)如斯敏捷的ELISA體系但是不小的影響。由于 聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，為到達(dá)別離游離的和結(jié)合的酶符號(hào)物的意圖，鏟除殘留在板孔中游離的物質(zhì)，以及非特異性地吸附的干 擾物質(zhì)，在洗刷時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來(lái)。洗刷板：能夠說(shuō)在ELISA操作中，洗刷是zui首要的紐帶技能。