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總*(T-CHO)含量測定試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

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所在地上海市

更新時間:2018-06-01 16:52:59瀏覽次數(shù):1358次

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總*(T-CHO)含量測定試劑盒
生成的醌類化合物顏色的深淺與*的含量成正比,分別測定校標(biāo)準(zhǔn)管和樣本管的吸光度值,計算*的含量。

總*(T-CHO)試劑盒說明書

For Research Use only

僅供研究用

貨號:QYS-239461

COD-PAP 法 96T

  • 試劑組成及配制:

試劑組成

規(guī) 格

組 份

濃 度

保存條件

 

 

 

酶液

 

 

 

25ml×1 瓶

Good’s 緩沖液

50mmol/L,pH6.7

 

 

 

 

28℃ 避光保存

*

5mmol/L

4-AAP

0.3mmol/L

*酯酶

≥50KU/L

*氧化酶

≥25KU/L

過氧化物酶

≥1.3KU/L

校準(zhǔn)品

0.1ml×1 瓶

*

見標(biāo)簽

附送 96 孔平底酶標(biāo)板一塊

室溫放置

  • 測定原理:

*酯

CE

*

+

脂肪酸

→→→

*

+

O2

CO

Δ

4

膽甾烯酮

+

H2O2

→→→

 

H2O2

+

4-AAP

+

3,5-DHBS

POD

紅色醌化物

+

H2O

→→→

生成的醌類化合物顏色的深淺與*的含量成正比,分別測定校標(biāo)準(zhǔn)管和樣本管的吸光度值,計算*的含量。

 

  • 操作過程:
  • 樣本處理:

①、血清(漿):直接測定,如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。

②、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清測定。

[注]:一般建議細胞密度在 100 萬個/ml 以上。

③、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍體積的勻漿介質(zhì),冰水浴條件下機械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清液待測。

[注]:1、如組織樣本不存在高脂樣本,勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進行提取。

2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本,勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用無水乙醇進行提取。

④、細胞樣本:

A、細胞收集:將制備好的細胞懸液取出,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;用等滲緩沖液(* 0.1mol/L、pH7~7.4 磷酸鹽緩沖液)清洗 1~2 次,同樣 1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;

B、細胞破碎:加入 0.2~0.3ml 的勻漿介質(zhì)(* 0.1mol/L、pH7~7.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水)進行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率 300W,3~5 秒/次,間隔 30 秒,重復(fù) 3~5  次) 或手動勻漿, 制備好的勻漿液不離心直接測定。也可采用裂解液裂解( *TritonX-100,1~2%,裂解 30~40 分鐘),裂解好的液體不離心直接測定。

[注]:一般建議收集的細胞密度在 100 萬個/ml 以上。破碎好的液體可顯微鏡觀察細胞是否破碎*

  • 操作表:

96 孔板操作,酶標(biāo)儀比色

 

空白孔

校準(zhǔn)孔

樣本孔

蒸餾水(μl)

2.5

 

 

校準(zhǔn)品(μl)

 

2.5

 

樣本(μl)

 

 

2.5

工作液(μl)

250

250

250

混勻后 37℃孵育 10 分鐘,波長510nm 處,酶標(biāo)儀測定各孔吸光度值。

 

全自動上機操作

樣本量/水

Sample Volume

μl

2.5

工作液

reagent

μl

250

37℃孵育 10 分鐘,工作液+蒸餾水調(diào)零,測定光吸收值 A。

主波長

Main wavelength

nm

510

反應(yīng)類型

Reaction type

 

終點法

反應(yīng)方向

Reaction direction

 

升反應(yīng)(+)

 

四、計算公式及舉例:

1.血清等液體樣本計算公式:

酶標(biāo)儀比色:

*量

=

樣本OD值- 空白OD值

X

校準(zhǔn)品濃度

(mmol/L)

校準(zhǔn)OD值- 空白OD值

(mmol/L)

 

 

 

*:

*量

=

A

X

 校準(zhǔn)品濃度

(mmol/L)

A

(mmol/L)

 

 

 

 

  • 取正常人血漿2.5μl,按操作表操作,得空白孔吸光度0.0443,校準(zhǔn)孔吸光度0.2344,樣本孔吸光度0.1724,則計算如下:

總*含量

=

樣本OD值- 空白OD值

X

校準(zhǔn)品濃度

=

0.1724-0.0443

X

5.17

=

3.4838mmol/L

(mmol/L)

校準(zhǔn)OD值- 空白OD值

(mmol/L)

0.2344-0.0443

 

  • 取大鼠血漿2.5μl,按操作表操作,得空白孔吸光度0.0443,校準(zhǔn)孔吸光度0.2344,樣本孔吸光度0.1011,則計算如下:

總*含量

=

樣本OD值- 空白OD值

X

校準(zhǔn)品濃度

=

0.1011-0.0443

X

5.17

=

1.5447mmol/L

(mmol/L)

校準(zhǔn)OD值- 空白OD值

(mmol/L)

0.2344-0.0443

 

2.組織、細胞計算公式:

酶標(biāo)儀比色:

*含量

=

樣本OD值- 空白OD值

X

校準(zhǔn)品濃度

¸

待測樣本蛋白濃度

(mmol/gprot)

校準(zhǔn)OD值- 空白OD值

(mmol/L)

(gprot/L)

 

*:

*含量

=

A樣

X

 校準(zhǔn)品濃度

¸

待測樣本蛋白濃度

(mmol/gprot)

A校

(mmol/L)

(gprot/L)

 

 

a、取10%小鼠肝勻漿2.5μl,按操作表操作,得空白孔吸光度0.0452,校準(zhǔn)孔吸光度0.2350,樣本孔吸光度0.1038,同時測得10%小鼠肝勻漿蛋白濃度為12.0121gprot/L,則計算如下:

 

總*含量

=

樣本OD值- 空白OD值

X

校準(zhǔn)品濃度

¸

待測樣本蛋白濃度

(mmol/gprot)

校準(zhǔn)OD值- 空白OD值

(mmol/L)

(gprot/L)

=

0.1038-0.0452

X

5.17

¸

12.0121

=

0.1329mmol/gprot

0.2350-0.0452

 

五、產(chǎn)品描述:

本試劑盒采用 COD-PAP 法配制,用于體外測定總*含量。適用于各型酶標(biāo)儀、半自動或*

 

六、性能指標(biāo):

1、試劑空白管吸光度≤0.100(光徑0.5cm)。

2、線性:0~10.34mmol/L 范圍內(nèi),r2>0.995。

3、精密度:CV≤3%,批間相對極差≤5%。

4、穩(wěn)定性:原裝試劑盒在 2℃~8℃避光保存,有效期為 12 個月。開啟后 2℃~8℃避光保存,可穩(wěn)定 3 個月。

 

七、注意事項:

1、本產(chǎn)品僅用于科研,不得用于臨床診斷,切勿服用。

2、樣品含量如超出檢測范圍上*,可用生理鹽水稀釋樣本后進行測定,測定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

3、試劑防止葡萄糖、*等試劑的污染。

4、試劑與樣本量可按照*的要求,按照 1:100 的比例增減

亞硝酸還原酶(NiR)試劑盒

亞硝酸還原酶(NiR)試劑盒、硝酸還原酶(NiR)是一類能催化亞硝酸鹽

總*檢測試劑盒

總*檢測試劑盒檢測原理$r$n總*在釩酸和表面活性劑的作用下被氧化成膽

直接*檢測試劑盒

直接*檢測試劑盒用于血清、血漿中直接*(DBIL)的定量測定。血清、血

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