植物全磷含量檢測(cè)試劑盒資料下載

注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義：

磷的存在形態(tài)包括無(wú)機(jī)磷與有機(jī)磷。無(wú)機(jī)磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等。通過(guò)測(cè)定總磷與無(wú)機(jī)磷含量即可了解作物對(duì)磷的利用率，進(jìn)而為合理施肥提供依據(jù)。

測(cè)定原理：

植株樣品用硫酸-過(guò)氧化氫消化，使各種形態(tài)磷轉(zhuǎn)變成正磷酸鹽，正磷酸鹽與鉬銻抗顯色劑反應(yīng)，生產(chǎn)磷鉬藍(lán)，藍(lán)色溶液的吸光度與含磷量呈正比例關(guān)系，用酶標(biāo)儀測(cè)定。

植物全磷含量檢測(cè)試劑盒資料下載自備儀器和用品：

石墨消解儀、離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿 /96 孔板、蒸餾水和濃硫酸。

試劑組成和配置：

試劑一：液體 50ml 
試劑二：液體 5ml
試劑三：粉劑×1 支，4℃避光保存。臨用前加 0.2mL 蒸餾水溶解。
試劑四：液體 0.4mL×1 支，4℃保存。
工作液：臨用前將試劑三和試劑四混合，加 19.4mL 蒸餾水混勻。(提供 20mL 棕色空瓶)

樣本消化：

1.將植物樣本 80℃烘干至恒重后粉碎，過(guò) 40 目篩，稱(chēng)取約 0.3g，加入消化管中，同時(shí)取空消化管兩支，用移液管分別往每管中加入 10mL 濃硫酸，輕輕晃動(dòng)消化管。

2.將 20 支消化管全部置于石墨消解儀上，蓋好蓋子，打開(kāi)廢氣回收系統(tǒng)以及石墨消解儀，溫度設(shè)置為：曲線(xiàn)加熱 100℃，10min；280℃，10min；400℃，40min。

3.將消化管冷卻至室溫，切勿在樣品冷卻之前開(kāi)蓋。每支消化管中緩慢加入 1mL 試劑二，搖勻，重新放置在石墨消解儀上，溫度設(shè)置為：曲線(xiàn)加熱 200℃，10min；320℃，10min；

400℃，30min。

4. 取出消化管冷卻至室溫，切勿在樣品冷卻之前開(kāi)蓋。每支消化管中緩慢加入 0.5mL 試劑

二，搖勻，重新放置在石墨消解儀上，溫度設(shè)置為：曲線(xiàn)加熱 200℃，10min；320℃，10min
400℃，30min。若樣本未呈現(xiàn)澄清狀態(tài)，應(yīng)重復(fù)步驟 4 至澄清，即消解*。

5.關(guān)閉石墨消解儀，待樣品冷卻后關(guān)掉廢氣回收系統(tǒng)。

6.取 2mLEP 管，每個(gè)加 900uL 蒸餾水，再加 100uL 消解液混勻后，再加試劑一 500uL，混勻后待測(cè)。

植物全磷含量檢測(cè)試劑盒資料下載測(cè)定操作表

    空白管    測(cè)定管
        
樣本（μL）        20
提取液（μL）    20    
工作液（μL）    180    180

充分混勻，25℃靜置 30min

于微量石英比色皿/96 孔板，蒸餾水調(diào)零，測(cè)定 700nm 處吸光值 A，分別記為 A 空白管和 A 測(cè)定管，△A=A 測(cè)定管-A 空白管

注意：空白管只需測(cè)定一次。計(jì)算公式

a.    用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：y = 0.2936x +0.0012，R2 = 0.9989
全磷含量（g/kg）=（△A-0.0012）÷ 0.2936×V 總×V 樣÷V 反總÷W×10-3×31
= 1.056×（△A-0.0012）÷W

V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.02mL；V 總：加入提取液體積，100mL，W：樣本質(zhì)量，g b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：y = 0.1468x +0.0012，R2 = 0.9989
全磷含量（g/kg）=（△A-0.0012）÷ 0.1468×V 總×V 樣÷V 反總÷W×10-3×31
= 2.112×（△A-0.0012）÷W

V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.02mL；V 總：加入提取液體積，100mL，W：樣本質(zhì)量，g
注意事項(xiàng)

1.配好的試劑 3 天內(nèi)使用完。

2.zui低檢出限為 0.25mg/Kg。