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ATP生物發(fā)光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品介紹和產(chǎn)品特點(diǎn)!信帆生物銷售ATP生物發(fā)光檢測(cè)試劑盒。
利用螢火蟲熒光素酶催化底物熒光素的轉(zhuǎn)化,利用ATP的能量發(fā)射出光子。發(fā)光信號(hào)與存在的ATP量呈正比的原理進(jìn)行ATP的生物發(fā)光檢測(cè)。該產(chǎn)品可用于快速、定量測(cè)定液體樣品中或細(xì)胞或組織內(nèi)的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。產(chǎn)品中的Lysis Buffer能夠有效裂解細(xì)菌、細(xì)胞以及微生物樣品,充分釋放ATP,適用于多種樣本來(lái)源的ATP檢測(cè)。Luciferase/Luciferin substrate采用優(yōu)化的酶反應(yīng)體系,產(chǎn)生的熒光在一分鐘內(nèi)保持穩(wěn)定。該產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度達(dá)到10-16 mol,檢測(cè)范圍在10-11至10-16 mol之間,可用于微量ATP檢測(cè)。
可用于檢測(cè)多種來(lái)源樣品中細(xì)菌、細(xì)胞以及微生物的ATP,及微量ATP檢測(cè)。
1. 方便:反應(yīng)試劑容易配制。
2. 檢測(cè)試劑產(chǎn)生的熒光穩(wěn)定性高,不需要快速混勻操作。
3. 快速:樣品裂解在5-10分鐘內(nèi)完成,加入稀釋后的Luciferase/Luciferin substratet即可檢測(cè)。
4. 靈敏:可檢測(cè)少至10-16 mol ATP。
ATP生物發(fā)光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品介紹和產(chǎn)品特點(diǎn)
壁細(xì)胞的裂解:
吸除培養(yǎng)液,加入足夠覆蓋細(xì)胞的Lysis Buffer(如24孔細(xì)胞培養(yǎng)板加入150ul Lysis Buffer),可以使用移液器進(jìn)行反復(fù)吹打或晃動(dòng)培養(yǎng)板使Lysis Buffer充分接觸并裂解細(xì)胞,室溫靜置5-10min后,吸取上清進(jìn)行檢測(cè)。
懸浮細(xì)菌、細(xì)胞的裂解:
轉(zhuǎn)移懸浮液到1.5ml離心管中,離心沉淀細(xì)胞,棄盡上清,按照24孔板每孔的細(xì)胞量對(duì)應(yīng)150μl Lysis Buffer的比例加入Lysis Buffer,移液器反復(fù)吹打幾次,室溫靜置5-10分鐘后,吸取上清進(jìn)行檢測(cè)。
對(duì)于懸浮樣品的裂解也可以將樣品充分混勻后直接吸取適量體積加入Lysis Buffer,移液器反復(fù)吹打幾次,室溫靜置5-10分鐘后進(jìn)行檢測(cè)。樣品體積不超過(guò)Lysis Buffer的1/3。
對(duì)植物、動(dòng)物組織樣品的裂解:
取適量組織樣品,加入適當(dāng)比例的Lysis Buffer(如20mg植物組織加入500ul Lysis Buffer)后用玻璃勻漿器或研缽進(jìn)行勻漿。充分勻漿可以確保組織被*裂解,離心后取上清進(jìn)行檢測(cè)。
其它來(lái)源的ATP:
對(duì)于其它有效方法如三氯乙酸法等提取的ATP樣品,或游離ATP的檢測(cè),可直接稀釋到檢測(cè)范圍后用配制好的Luciferase/Luciferin Reagent進(jìn)行檢測(cè)。
3. 樣品測(cè)定:
(1)ATP標(biāo)準(zhǔn)品的測(cè)定:吸取50ul配制好的Luciferase/Luciferin Reagent加入測(cè)定管中,放置2分鐘以減少背景發(fā)光值,加入10ul 配制好的ATP標(biāo)準(zhǔn)品,移液器輕輕吹打幾次,立即進(jìn)行檢測(cè)。制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照,即不添加ATP,直接將10ul Lysis Buffer加入50ul Luciferase/Luciferin Reagent中進(jìn)行檢測(cè),測(cè)定試劑的背景發(fā)光值。如果背景發(fā)光值過(guò)高,可以將配制好的Luciferase/Luciferin Reagent放入測(cè)定管后室溫放置15分鐘以消耗ATP,降低背景發(fā)光值。
(2)樣品的測(cè)定:吸取50ul Luciferase/Luciferin Reagent加入測(cè)定管中,加入10ul 樣品裂解混合液,移液器輕輕吹打幾次,立即進(jìn)行檢測(cè)。
(3)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中ATP的濃度。
ATP生物發(fā)光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品介紹和產(chǎn)品特點(diǎn)
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