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超氧陰離子清除能力試劑盒說(shuō)明書(shū)

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規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體1mL×1支,4℃避光保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加4mL蒸餾水充分溶解。
試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
產(chǎn)品說(shuō)明:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋
白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機(jī)體衰老和
病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對(duì)氨基苯磺酸和α-萘
胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對(duì)超氧陰離子的清除能力與530nm
的吸光值呈負(fù)相關(guān)。

操作步驟:
一、樣品處理
1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g,加入1mL提取液)
加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入
1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后4℃,
10000g離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3. 培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測(cè)。
4. 粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/mL。

注意事項(xiàng):
1. 試劑一4℃可保存2 個(gè)月,配制好的試劑二4℃可保存一周,建議實(shí)驗(yàn)前配制,并盡快使用。
2. 樣品處理完后立即進(jìn)行測(cè)定,或者低溫保存不超過(guò)24 小時(shí)

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