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血清在動物細胞培養(yǎng)中的作用
【產(chǎn)品名稱】 :標準大鼠血清(無菌)
【貨號】:XG0102
【產(chǎn)品規(guī)格】 :100ml
【儲存條件】 :-20℃
【有效期】 :1年
【產(chǎn)品簡介】:
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
血清在動物細胞培養(yǎng)中的作用:
1. 提供細胞生存和增值所必需的生長調(diào)節(jié)因子。
2. 補充基礎培養(yǎng)基中沒有或量不足的營養(yǎng)成分。
3. 含有一些可供貼壁細胞型細胞鐵壁生長的基質(zhì)成分。
4. 提供載體蛋白,可結(jié)合維生素、脂質(zhì)、金屬離子等。
5. 在一些情況下,中和毒性物質(zhì)保護細胞不受傷害。
6. 給培養(yǎng)液提供良好的緩沖系統(tǒng)。
7. 提供蛋白酶抑制劑,保護細胞免受死細胞釋放的蛋白酶的傷害。
血清的使用注意事項:
1. 需要保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
2. 熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量,補體參與反應有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。
3. 瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
4. 血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點"。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
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