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阿利新藍(lán)染色液使用小竅門
簡(jiǎn)介:阿利新藍(lán)(Alcian)又稱愛先藍(lán)或阿爾辛藍(lán)等,是一種陽(yáng)離子染料,染料與酸性基團(tuán)形成鹽鍵。利用染料的不同pH及不同電解質(zhì)濃度,可區(qū)分酸性黏液物質(zhì)的類別。阿利新藍(lán)作為一種類銅鈦花青共軛染料,最初用于紡織纖維染色。這種陽(yáng)離子染料與酸性基團(tuán)結(jié)合,也即阿爾辛藍(lán)與組織內(nèi)含有的陰離子基團(tuán)如羧基和硫酸根形成不溶性復(fù)合物。阿利新藍(lán)由中央含銅的酞菁環(huán)與四個(gè)異硫脲基通過(guò)硫醚鍵相連而成,該異硫脲基呈中度堿性,使阿利新藍(lán)帶陽(yáng)離子。pH 值為2.5時(shí),組織內(nèi)的羧基電離,帶有一個(gè)負(fù)電荷,與阿利新藍(lán)中的陽(yáng)離子形成鹽鍵,使帶有羧基的酸性黏液物質(zhì)(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。
阿利新藍(lán)染色液(pH1.0)利用染液的不同 pH 值可區(qū)分粘液物質(zhì)的類屬,pH為1時(shí),羧基(COOH)不著色,硫酸基(OSO3H)著色,pH為2.5時(shí),羧基染色良好而硫酸粘液著色不佳。pH 值為 1.0 時(shí),組織內(nèi)的硫酸根電離,帶有一個(gè)負(fù)電荷,與阿利新藍(lán)中的陽(yáng)離子形成鹽鍵,使帶有硫酸根的組織(如硫酸黏液物質(zhì))染色。中性黏蛋白(如胃黏膜和 Brunner 腺體部位的中性黏蛋白)不能與阿利新藍(lán)反應(yīng)。
保存條件:
室溫保存。
操作步驟(僅供參考):
1、二甲苯脫蠟,通過(guò)梯度乙醇后,入蒸餾水再水化。
2、Alcian酸化工作液浸泡5min。
3、Alcian染色液浸染30min。
4、流水沖洗。
5、Alcian酸化工作液稍洗。
6、不經(jīng)水洗,直接用濾紙吸干多余的Alcian酸化工作液。
7、核固紅染色液,復(fù)染,流水沖洗。
8、常規(guī)乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。
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