細(xì)胞粘附劑提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率

一種新型化合物，用之室溫處理培養(yǎng)瓶 30 分鐘，能夠使原代或傳代培養(yǎng)細(xì)胞的粘附貼壁能力顯著增加，處理效果優(yōu)于使用多聚賴氨酸和膠原蛋白，同時(shí)對絕大多細(xì)胞類型均有明顯效果，例 如：膠原蛋白處理瓶皿對 HEK293 細(xì)胞無效，但細(xì)胞貼壁粘附劑 對 HEK293 細(xì)胞有很好的 效果， 且能顯著提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。本產(chǎn)品無細(xì)胞毒性，不影響后續(xù)免疫熒光組化和酶學(xué)測定等實(shí) 驗(yàn)，適用于各種原代細(xì)胞如乳鼠腦神經(jīng)元、易漂浮的傳代細(xì)胞如 PC12 和 HEK293 細(xì)胞，也適用于 藥物處理易漂浮細(xì)胞；其不僅能夠明顯改善細(xì)胞生長狀態(tài)、增加細(xì)胞數(shù)量，還可以使細(xì)胞容易耐受 洗滌、換液、藥物處理造成的脫落。對于生長在處理過的瓶皿中的細(xì)胞而言，使用細(xì)胞貼壁粘附劑 可使細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率顯著增加 2-5 倍。

一種新型化合物，用之室溫處理培養(yǎng)瓶 30 分鐘，能夠使原代或傳代培養(yǎng)細(xì)胞的粘附貼壁能力顯著增加，處理效果優(yōu)于使用多聚賴氨酸和膠原蛋白，同時(shí)對絕大多細(xì)胞類型均有明顯效果，例 如：膠原蛋白處理瓶皿對 HEK293 細(xì)胞無效，但細(xì)胞貼壁粘附劑 對 HEK293 細(xì)胞有很好的 效果， 且能顯著提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。本產(chǎn)品無細(xì)胞毒性，不影響后續(xù)免疫熒光組化和酶學(xué)測定等實(shí) 驗(yàn)，適用于各種原代細(xì)胞如乳鼠腦神經(jīng)元、易漂浮的傳代細(xì)胞如 PC12 和 HEK293 細(xì)胞，也適用于 藥物處理易漂浮細(xì)胞；其不僅能夠明顯改善細(xì)胞生長狀態(tài)、增加細(xì)胞數(shù)量，還可以使細(xì)胞容易耐受 洗滌、換液、藥物處理造成的脫落。對于生長在處理過的瓶皿中的細(xì)胞而言，使用細(xì)胞貼壁粘附劑 可使細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率顯著增加 2-5 倍。 選擇素(selectin)屬親異性CAM,其作用依賴于Ca2+。主要參與白細(xì)胞與脈管內(nèi)皮細(xì)胞之間的識別與粘合。已知選擇素有三種:L選擇素、E 選擇素及P選擇素。

選擇素的胞外區(qū)由三個(gè)結(jié)構(gòu)域構(gòu)成:N端的C型凝集素結(jié)構(gòu)域,EGF樣結(jié)構(gòu)域、重復(fù)次數(shù)不同的補(bǔ)體結(jié)合蛋白結(jié)構(gòu)域;通過凝集素結(jié)構(gòu)域來識別糖蛋白及糖脂分子上的糖配體。

E選擇素及P選擇素所識別與結(jié)合的糖配體為唾液酸化及巖藻糖化的N 乙酰氨基乳糖結(jié)構(gòu)(sLeX及sLeA)。sLeA結(jié)構(gòu)存在于髓系白細(xì)胞表面(其中包括L選擇素)分子中。多種腫瘤細(xì)胞表面也存在sLeX及sLeA結(jié)構(gòu)。

P選擇素貯存于血小板的α顆粒及內(nèi)皮細(xì)胞的Weibel-Palade小體。炎癥時(shí)活化的內(nèi)皮細(xì)胞表面首先出現(xiàn)P選擇素,隨后出現(xiàn)E選擇素。它們對于召集白細(xì)胞到達(dá)炎癥部位具有重要作用。

E選擇素存在于活化的血管內(nèi)皮細(xì)胞表面。炎癥組織釋放的白細(xì)胞介素I(IL-1)及腫瘤壞死因子(TNF)等細(xì)胞因子可活化脈管內(nèi)皮細(xì)胞,刺激E 選擇素的合成。

L選擇素廣泛存在于各種白細(xì)胞的表面,參與炎癥部位白細(xì)胞的出脈管過程。白細(xì)胞表面L選擇素分子上的sLeA與活化的內(nèi)皮細(xì)胞表面的P選擇素及E選擇素之間的識別與結(jié)合,可召集血液中快速流動(dòng)的白細(xì)胞在炎癥部位的脈管內(nèi)皮上減速滾動(dòng)(即通過粘附、分離、再粘附……,如此循環(huán)往復(fù)),最后穿過血管進(jìn)入炎癥部位。

炎癥一開始即啟動(dòng)白細(xì)胞的功能變化,各種選擇素均使血管中白細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)減慢而形成滾動(dòng)狀態(tài),其中P-選擇素和L-選擇素在缺血-再灌注過程中的作用更大。