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上海一研生物科技有限公司

直接免疫熒光法的注意事項(xiàng)

時(shí)間:2015-7-15閱讀:694
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?  對(duì)熒光標(biāo)記的抗體的稀釋:要保證抗體的蛋白有一定的濃度;

?  一般稀釋度不應(yīng)超過1:20,抗體濃度過低,會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生的熒光過弱,影響結(jié)果的觀察。

直接免疫熒光法的注意事項(xiàng) (續(xù))

?  染色溫度和時(shí)間需要根據(jù)各種不同的標(biāo)本及抗原而變化;

–  染色時(shí)間:從10 min到數(shù)小時(shí),一般30 min;
–  染色溫度:多采用室溫(25?C),高于37?C可加強(qiáng)染色效果,但對(duì)不耐熱的抗原(如流行性乙型腦炎病毒)可采用0-2?C的低溫,延長(zhǎng)染色時(shí)間。
–  低溫染色過夜較37 ?C 30 min效果好的多。
?

直接免疫熒光法的注意事項(xiàng) (續(xù))
?  試驗(yàn)時(shí)需設(shè)置下列對(duì)照:
–  自發(fā)熒光對(duì)照(空白對(duì)照):標(biāo)本加0.01mol/L,pH7.4的PBS代替一抗。
–  陽(yáng)性對(duì)照:用已知的陽(yáng)性標(biāo)本加熒光標(biāo)記的特異性抗體。
–  特異性對(duì)照(抑制試驗(yàn)):標(biāo)本加未標(biāo)記的特異性抗體,再加熒光標(biāo)記的特異性抗體。
?  若標(biāo)本自發(fā)熒光對(duì)照和特異性對(duì)照呈無熒光或弱熒光,陽(yáng)性對(duì)照和待檢標(biāo)本呈強(qiáng)熒光,則為特異性陽(yáng)性染色。

?直接免疫熒光法的注意事項(xiàng) (續(xù))
?  一般標(biāo)本在高壓汞燈下照射超過3min,就有熒光減弱現(xiàn)象;
?  經(jīng)熒光染色的標(biāo)本在當(dāng)天觀察,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),熒光強(qiáng)度會(huì)逐漸下降。

英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣腔蛋白(CALU)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Rattus norvegicus (Rat) 鈣腔蛋白(CALU)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣黏蛋白9(CDH9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣黏蛋白8(CDH8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
抗體英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣黏蛋白7(CDH7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣黏蛋白26(CDH26)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣黏蛋白24(CDH24)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

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