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20世紀80年代以來,丹麥科學(xué)家Gundersen建立的現(xiàn)代無偏體視學(xué)方法為微觀形態(tài)結(jié)構(gòu)準確定量研究提供了可靠方法。當我們談到現(xiàn)代體視學(xué)方法時,需感謝Gundersen教授對體視學(xué)的貢獻。因為當今在上廣泛應(yīng)用的現(xiàn)代體視學(xué)方法絕大部分是由以Gundersen教授為代表的丹麥科學(xué)家發(fā)明。體視學(xué)方法是一系列用于準確獲得組織細胞和亞細胞結(jié)構(gòu)三維形態(tài)定量特征的方法。在上,體視學(xué)方法被廣泛應(yīng)用于生物 學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)。特別值得強調(diào)的是,新的體視學(xué)方法已與各類組織細胞的特殊染色、免疫組織化學(xué)及分子生物學(xué)圖像(如原位分子雜交圖像)等結(jié)合起來,用于對經(jīng)過基因改造(轉(zhuǎn)基因或基因剔除)的動物模型的定量研究中。因此,體視學(xué)方法已成為連接形態(tài)學(xué)、功能學(xué)和分子生物學(xué)研究的橋梁。
在實際應(yīng)用水平上,體視學(xué)方法是一種基于二維切片觀察而獲得顯微結(jié)構(gòu)三維定量信息的有效手段。在統(tǒng)計概率的意義上講,二維切片包含有三維結(jié)構(gòu)的定量信息。但是,如果要使二維切片獲得的信息真實地反映三維信息,在器官、切片、視野及空間方向上的抽樣都必須滿足一些基本原則。在運用當中這些抽樣原則很容易實現(xiàn)。但同樣也很容易失誤。因此,基于以上所述.我們首先需明確二維切片與三維結(jié)構(gòu)的關(guān)系以及如何有效獲得二維信息,并在此基礎(chǔ)上討論獲得體積、表面積、長度和數(shù)量等三維定量信息的方法。細胞
體視學(xué)的優(yōu)勢在于它以三維定量數(shù)據(jù)來表達特征結(jié)構(gòu)信息,先撇開體視學(xué)在統(tǒng)計學(xué)基礎(chǔ)上確立的抽樣原則不談,我們所用來觀察的二維切片首先應(yīng)該是包含有特征物的。而不論通過什么窗口(如光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡和激光掃描共聚焦顯微鏡等)來獲取二維切片圖像,包含特征物的器官組織均稱為參照空間,我們便是在一定參照空間內(nèi)研究特征物的三維定量信息。例如要研究大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元,那么。大鼠大腦皮質(zhì)則是參照空間。在進行體視學(xué)研究時,對于參照空間有明確要求,首先,參照空間中包含著特征物;其次,參照空間的邊界清晰可辨;再次,參照空間易于獲取。
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