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本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合。換言之,包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,通用ELISA試劑盒在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對該抗原的特異抗體作預包被,其后通過抗原抗體反應使抗原固相化。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入*化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。據(jù)已經(jīng)使用的結果,認為法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標本,因此,也適合于血清流行病學調(diào)查。
因此法在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大,通用ELISA試劑盒可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
通用ELISA試劑盒載體的外形主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。固相載體在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,不介入化學反應。板式及珠式ELISA的標本量一般為100-200ul,而小試管可根據(jù)需要加大反應體積,標本反應量的增加有助于試驗敏感性的進步?,F(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操縱的尺度化極為有利。為便于作少量標本的檢測,有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的,放入座架后,大小與尺度ELISA板相同。聚苯乙烯經(jīng)射線照射后,其吸附機能特別是對免疫球蛋白的吸附機能增加,應用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,但用于間接法測抗體時空缺值較大。也有應用聚苯乙烯膠乳或其他材料制成的微粒作為ELISA試劑盒固相載體的。聚氯乙烯對蛋白質的吸附機能比聚苯乙烯高,但空缺值也略高。聚苯乙烯通用ELISA試劑盒板因為原料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質量差異很大,因此,每一批號的ELISA板在使用前須事先檢查其機能。
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