在通用ELISA試劑盒測定中試劑的準備zui為關鍵的是，在實驗開始前，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20min以上后，再進行測定，以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面，能使反應微孔內的溫度較快地達到所要求的高度，以滿足測定要求。

操作步驟如下：

(1)將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。
(2) 待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原，則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原，則 與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合，競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結合的機會，使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原，保溫 后，酶標抗原與固相抗體的結合可達zui充分的量。洗滌。
(3)加底物顯色：參考管中由于結合的酶標抗原zui多，故顏色zui深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差，代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡，表示標本中抗原含量越多。
通用ELISA試劑盒間接法、競爭法、捕獲法，應用親和素和*的ELISA親 和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個*分子親密結合?，F(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和 素。*又稱維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物，*-羥 基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成*化的產物。親和素與*的結合，雖不屬免疫反應，通用ELISA試劑盒但特異性強，親和力大， 兩者一經結合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個*分子的結合位置，可以連接更多的*化的分子，形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物 素與ELISA偶聯(lián)起來，就可大大提高ELISA的敏感度。