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為使儀器保持*工作狀態(tài)應建立維護和校正儀器的標準操作程序(SOP),所要控制的儀器包括移液器(加樣槍),水浴箱(溫箱),洗板機和酶標儀。
◎移液器:ELISA加樣量?。?-100ul),其準確性直接影響實驗結(jié)果,利用稱重法檢查:吸取刻度指示量的水,萬分之一天平稱重后計算吸量是否準確,一般應在±10%以內(nèi);
◎水浴箱 經(jīng)常檢查水浴箱溫度計所示的溫度和水中(或溫箱內(nèi))實測溫度是否一致,人ELISA試劑盒允許有±1℃的誤差;
◎洗板機 每個廠家設置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定一般不超過2ul ,人工扣板時,墊紙不濕,定期檢查管孔是否堵塞;
◎酶標儀 經(jīng)常維護其光學部分,防止濾光片霉變,人ELISA試劑盒定期檢測校正,使其保持良好的工作性能。
附1:酶標儀校正程序
◎濾光片波長精度檢查:將不同波長的濾光片從酶標儀上卸下,用UV-2201型紫外-可見分光光度計(波長精度±0.3nm)于可見光區(qū)對每個濾光片進行掃描,其檢測值與標定值之差為濾光片波長精度。
◎通噵差與孔間差檢測:通道差檢測是取一只酶標板小孔杯(杯底須光滑,透明,無污染以酶標板架作載體, 將其(內(nèi)含200ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.500A左右)置于8個通道的相應位置,蒸溜水調(diào)零,1于490nm處連續(xù)測三次,觀察其不同通道的檢測器測量結(jié)果的一致性,可用極差值來表示??组g差的測量是選擇同一廠家,同一批號酶標2板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)至0.100A左右)先后置于同一通道,蒸溜水調(diào)零,于490nm處檢測,其誤差大小用±1.96s衡量。
n 零點飄移(穩(wěn)定性觀察):取8只小孔杯分別置于8個通道的相應位置,均加入200ul蒸溜水并調(diào)零,于490nm處每隔30分鐘測一次,觀察各個通道4小時內(nèi)吸光度的變化。
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