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HPLC的故障及處理

閱讀:250發(fā)布時間:2015-08-03

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(一) 保留時間變化

1.柱溫變化 柱恒溫。

2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動相平衡柱。

3.緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液。

4.柱污染 每天沖洗柱。

5.柱內(nèi)條件變化 穩(wěn)定進樣條件,調(diào)節(jié)流動相。

6.柱快達(dá)到壽命 采用保護柱。

(二) 保留時間縮短

1.流速增加 檢查泵,重新設(shè)定流速。

2.樣品超載 降低樣品量。

3.鍵合相流失 流動相pH值保持在3~7.5,檢查柱的方向,

4.流動相組成變化 防止流動相蒸發(fā)或沉淀。

5.溫度增加 柱恒溫。

(三) 保留時間延長

1.流速下降 管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡。

2.硅膠柱上活性點變化 用流動相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱。

3.鍵合相流失 同前(二)3。

4.流動相組成變化 同前(二)4。

5.溫度降低 同前(二)5。

(四) 出現(xiàn)肩峰或分叉

1.樣品體積過大 用流動相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%。

2.樣品溶劑過強 采用較弱的樣品溶劑。

3.柱塌陷或形成短路通道 更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件。

4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效 更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品。

5.進樣器損壞 更換進樣器轉(zhuǎn)子。


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