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血漿游離血紅蛋白測定

閱讀：319發(fā)布時間：2015-07-06

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實驗原理
 
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化，由無色zui終變?yōu)樗{紫色。根據(jù)顯色深淺與標準進行比較，可測出其含量。
 
實驗方法
 
材料：
 
1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
 
2．1%H2O2
 
3．10%醋酸溶液
 
4．分光光度計
 
方法：
 
1.抽取靜脈血2-3ml，*抗凝，離心分離血漿。
 
2．按下表進行操作，用分光光度計，波長為530nm，以空白管調(diào)零，測定測定管的吸光度。


試劑 （ml）

測定管

空白管

2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

0.5

0.5

患者血漿

0.02

/

1% H2O2

0.5

0.5

混勻后室溫放置10min

10%醋酸溶液

5.0

5.0

室溫放置10min


3.計算公式
 
血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
 
實驗結(jié)果計算
 
參考范圍：0-40mg/L
 
注意事項
 
1.一切容器避免血紅蛋白污染；
 
2.采血要順利，器皿要干燥，檢測血漿要新鮮，及時分離，防止人為溶血；
 
3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性，檢測時要小心，廢液要妥善處理，以免污染；
 
4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準確。


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