實(shí)驗(yàn)材料 細(xì)菌
試劑、試劑盒 胰化蛋白胨酵母提取物氯化鈉NaOH
儀器、耗材 培養(yǎng)瓶玻璃棒離心管搖床
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 在3個(gè)無(wú)菌培養(yǎng)試管中各加人5 ml LB培養(yǎng)液，并標(biāo)上序號(hào)1、2、3。
2. 吸取5 μl 細(xì)菌培養(yǎng)液加入1號(hào)試管中振蕩揺勻。
3. 接著從1號(hào)試管吸5 μl 稀釋液加入 2號(hào)試管振蕩搖勻。
4. 從2號(hào)試管吸5 μl 稀釋液加入3號(hào)試管振蕩搖勻，每次都使用新的吸頭。
5. 從每個(gè)試管中分別取100 μl 菌液涂布于LB平皿上，并且做好記號(hào)，待平板干后于 37℃培養(yǎng)。
6. 計(jì)算每亳升細(xì)菌細(xì)胞數(shù)：細(xì)菌細(xì)咆?cái)?shù)/ml=10×菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)。
7. 包裹好平板保存于4℃以備進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)用。
實(shí)驗(yàn)材料 細(xì)菌
儀器、耗材 接種環(huán)培養(yǎng)皿
實(shí)驗(yàn)步驟
一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1. 接種環(huán)
（1）滅菌，將接種環(huán)置于本生燈火焰中灼燒直至變紅。
（2）冷卻，將接種環(huán)觸碰無(wú)菌瓊脂平板的表面直至其不發(fā)出咝咝聲。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 采用無(wú)菌操作技術(shù)，用接種環(huán)將接種物從平板的一側(cè)開(kāi)始劃線(xiàn)。
2. 重新消毒接種環(huán)，從*劃線(xiàn)處將樣品劃線(xiàn)至平板的其佘部分，重復(fù)劃線(xiàn)直至覆蓋整個(gè)平板。
3. 于37℃培養(yǎng)直至長(zhǎng)出單菌落。
4. 如果要從很多的菌液中分離單克隆，可以將平 板分為4、6或8小份，在每個(gè)小份中劃出單克隆。
實(shí)驗(yàn)材料 細(xì)菌
儀器、耗材 涂布棒培養(yǎng)箱培養(yǎng)皿
實(shí)驗(yàn)步驟
一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1. 涂布棒
（1）加熱并彎曲一支直徑4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制備涂布棒。
（2）滅菌，將涂布棒的三角部分浸沒(méi)于酒精中，從容器中取出后再通過(guò)燈焰，點(diǎn)燃其上的乙醇。
（3）待涂布棒上的火焰熄滅后，將其觸碰無(wú)菌瓊脂平板的表面使其冷卻。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 吸取0.05~1 ml 培養(yǎng)物至一只干的平板上。
2. 用涂布棒作圓周運(yùn)動(dòng)將培養(yǎng)液涂布均勻，或用涂布棒的邊緣在平板的表面劃光柵圖案 （一系列平行線(xiàn)）然后轉(zhuǎn)動(dòng)平板并與已涂布的平行線(xiàn)成直角重復(fù)涂布。
3. 平板蓋微開(kāi)至平板*晾干，于37℃培養(yǎng)。
會(huì)員1.png)